| 研究課題/領域番号 |
05671341
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
泌尿器科学
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| 研究機関 | 東京女子医科大学 |
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研究代表者 |
木原 健 東京女子医科大学, 医学部, 講師 (60195344)
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| 研究分担者 |
東間 紘 東京女子医科大学, 医学部(泌尿器科), 教授 (90075549)
伊藤 文夫 東京女子医科大学, 医学部(泌尿器科), 助手 (20211683)
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| 研究期間 (年度) |
1993 – 1995
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| キーワード | DNAトランスフェクション / 温熱感受性リポソーム / Sendai Virus / TMAG |
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| 研究概要 |
DPPC;DSPCにTMAGを加えたliposomeにDNA(PMIWZ)を封入し、sendui virusを表面に融合したneoSTD liposomeを作製、in vitroにおける腎尿細管上皮、腎癌細胞に対するPMIWZのtransfectionを試みた。
〈方法〉1.neo STD liposomeの作製
リポソーム構成脂質としてDPPC9、DSPC1に加え、陽性加電を有するTMAGを種々の割合で混合したリポソームを作製し、相転移温度、粒子径を観察した後、PMIWZを封入し、sendai virusをリポソーム表面に融合し、neo STD liposomeを作製
2.ヒト尿細管上株LLCPK-I、腎細胞癌株ACHNを継代培養し、neo STD liposomeによるPMIWZのtransfectionを試みた。DNA transfectionを確認するためPMIWZの産生するガラクトシターゼの発現を観察した。
〈結果〉1.DPPC9、DSPC1、TMAG1の比で作製したLUVの担転移温度は41℃。粒子径200〜300mmであった。
※2)neo STD liposomeを用い、LLCPK-I、ACHNともにガラクトシダーゼの発現が観察できた。ガラクトシダーゼの確認にはXgalを用いた蛋白発現を観察し、さらにsonthern blot,Northa blotを用いてDNA RNAの確認も行った。
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