癌化肥満細胞のプロスタグランジンE受容体の構造と情報伝達に関する研究

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05671816
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 根岸 学 京都大学, 薬学部, 助手 (60201696)
• 研究分担者: 杉本 幸彦 京都大学, 薬学部, 助手 (80243038)
• キーワード: プロスタグランジンE2 / 受容体 / サフタイプ / イソフォーム / G蛋白質 / 情報伝達

研究概要

我々は、シクロオキシゲナーゼ系のプロスタノイドに対する受容体のcDNAをクローニングし、その分子構造を明らかにしてきた。更に、プロスタグランジン(PG)E受容体の1つのサブタイプ、EP3には1つの遺伝子から選択的RNAスプライシングにより生ずる、C末端鎖のみの異なる複数のイソフォームが存在し、それらは会合するG蛋白質の種類が異なることを示した。
クローニングしたEP1をCHO細胞に発現させ、その情報伝達機構を検討した。EP1は細胞外からのCa^<2+>流入を引き起こすが、この作用は百日咳毒素やコレラ毒素に対する感受性はなく、EP1はGiやGs以外のG蛋白質を介して細胞膜上のCa^<2+>透過性カチオンチャンネルを活性化すると考えられる。EP1によるCa^<2+>透過性カチオンチャンネルの活性化は、ホスホリパーゼCの阻害剤で抑制されないことから、Gq-ホスホリパーゼC系により生じたIP_3により間接的に活性化されるCa^<2+>チャンネルとは異なる全く新しい機構で活性化されるチャンネルであると考えられる。又、EP1はCa^<2+>透過性カチオンチャンネルの活性化により流入したCa^<2+>により2次的にホスホリパーゼCを活性化する。
クローニングした3つのPGE受容体のサブタイプの腎臓における発現部位を、インジツハイブリダイゼーション法により解析した。EP1は、集合管の乳頭部に、EP2は皮質のメサンギウム細胞に、EP3は皮質から髄質にかけての集合管やヘンレループに高い発現が見られた。このことは、3つのサブタイプが、腎臓でそれぞれ異なる部位において腎臓の別々の機能を調節していることが推察される。

研究成果

• [文献書誌] Namba,Tsunehisa: "cDNA Cloning of a Mouse Prostacyclin Receptor" Journal of Biological Chemistry. 269. 9986-9992 (1994)
• [文献書誌] Sugimoto,Yukihiko: "Cloning and Expression of a cDNA for MOuse Prostaglandin F Recept" Journal of Biological Chemistry. 269. 1356-1360 (1994)
• [文献書誌] Harazono,Akira: "Enhancement of Adenylate Cyclase Stimulation by Prostaglandin E Recepto EP3 Subtype Isoforms with Different Efficiencies" Biochemical and Biophysical Research Communications. 201. 340-345 (1994)
• [文献書誌] Irie,Atsushi: "The C-terminus of the prostaglandin-E receptor EP3 subtype is essential for activation of GTP-binding protein" Eur.J.Biochem.224. 161-166 (1994)
• [文献書誌] Irie,Atsushi: "Mouse Prostaglandin E Receptor EP3 Subtype Mediates Calcium Signals via GI in cDNA-transfected Chinease Hamster Ovary Cells" Biochemical and Biophysical Research Communications. 204. 303-309 (1994)
• [文献書誌] Negishi,Manabu: "TEI-3356,A Highly Selective Agonist for the Prostaglandin EP3 Receptor" Prostaglandins. 48. 275-283 (1994)