シナプス小胞における興奮性アミノ酸の蓄積機構に関する生化学的,薬理学的研究

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05671821
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 森山 芳則 大阪大学, 産業科学研究所, 助手 (10150658)
• キーワード: グルタミン酸 / シナプス小胞 / 伝達物質 / 液胞型ATPase / 輸送系 / 神経

研究概要

グルタミン酸による興奮の伝達機構は最近の神経化学の中心課題の一つである。本研究は、シナプス小胞におけるグルタミン酸の濃縮機構につき、特に(1)グルタミン酸輸送体の精製、(2)阻害剤(アンタゴニスト)の開発及び(3)輸送のエネルギーを供給する一次ポンプである液胞型ATPaseの構造的な解析を目的とした。現在まで研究計画は順調に進んでいる。すなわち、(1)のF-ATPaseとの再構成系を確立し、リポソームにおいて再現性よくグルタミン酸の輸送活性が測定できるようになった。これを用い、現在精製を行っている。(2)阻害剤の開発に関して、既に100におよぶグルタミン酸誘導体を調べ、数種の化合物を阻害剤として同定した。その構造活性相関を部分的ではあるが得ることができ、より強力な化合物に到達すべく新たにドラッグデザインを行った。(3)にかんしては、新たにオメプラゾールとキナクリンマスタードがV-ATPaseのAサブユニットに結合する阻害剤であることを見いだした。オメプラゾールはATP結合部位近傍に結合する。以上の成果の一部は既に論文として発表した。また、一部は現在、論文を作製中である。

研究成果

• [文献書誌] Yoshinori Moriyama et.al.: "ATP-dependent uptake of anti-neoplastic agents by Rcidic organelles." Journal of Biochemistry. 115. 213-218 (1994)
• [文献書誌] Deguchi,Junko et.al.: "Acidification of phagosomes and degradation of rod outer seqments in rat retinal pigment epithelium." Inrestigation Ophthalmolog Visnal Science. (印刷中). (1994)
• [文献書誌] Yoshinori Moriyama et.al: "Evidence for a common binding site for omeprazole and N-ethylmaleimide in subunit A of obromaffin granule vacuolar-type ATPase" Biochemical Biophysical Research Communications.196. 699-706 (1993)
• [文献書誌] Yoshinori Moriyama et.al: "ATP-dependent a cuimulation of neuron blockers cause selective inhibition of storage of frams mitters in secretory vosicles." Archives Biochemistry and Biophysico. 305. 278-281 (1993)
• [文献書誌] Henomatsu N et.al: "Inhibition of vacuolar type H^+-ATPase by hafilomycin Al causes perturbation of secretory pathway in a pituitary tumor cell line." European journal of Cell Biology. 62. 127-139 (1993)
• [文献書誌] Moriyama,Yoshinori et.al.: "Uptake of 4-methgls henglpyridium by chromaffin granules and synaptic vesicles vin monoamine tromsporter." Archives of Biochemistry and Biophysico. 305. 271-277 (1993)