| 研究概要 |
癌における化学療法の大きな障害となっている抗癌剤耐性の機序を解明するために,本年度は基礎的研究としてのシスプラチン耐性機序解明とその克服の系の1つ耐性細胞株へのtos遺伝子に対するリボザイムの導入実験を発展させた。さらに、大腸癌培養細胞株を用いて5-Fu,タクソールならびにCPT-IIなどの抗癌剤長期曝露での耐性株モデルを数種樹立した。これらの耐性獲得株は感受性株と比較して共通してDNA修復関連酵素遺伝子の発現増加が明らかとなった。これらを指標としてRT-PCR法による耐性発現の早期診断法に応用し,臨床検体について現在解析中である。克服に関する系としては,それら耐性に関与する遺伝子に対するアンチセンス/リボザイムを作製してその遺伝子発現抑制および薬剤感受性回復作用の検討から耐性獲得機序解明を目指している。一方,関連研究として癌の増殖抑制についてマウスの皮下移植実験におけるアンチセンス/リボザイム作用を検討した。その結果,変異H-rasリボザイムを導入したメラノーマ細胞あるいは膀胱癌細胞は可移植率の低下ならびに増殖率の低下を来すという成果を得た。このアンチセンス/リボザイムによる癌遺伝子を標的とした増殖抑制効果は特定の遺伝子発現を抑制することで得られることから,今後抗癌剤耐性機序克服への応用が期待された。また,in vivoでのアンチセンス/リボザイムを効率よく発現させるための発現ベクターを含むプラスミドの検討が必要であり,その数種についても現在検討中である。
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