| 研究課題/領域番号 |
05671922
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
病態検査学
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
赤水 尚史 京都大学, 医学部, 助手 (20231813)
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| 研究分担者 |
松田 文彦 京都大学, 遺伝子実験施設, 助手 (50212220)
須川 秀夫 京都大学, 医学部, 講師 (70162857)
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| 研究期間 (年度) |
1993 – 1994
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| キーワード | VH遺伝子 / TSHレセプター / 抗TSHレセプター抗体 / バセドウ病 / Graves'disease, / Hypothyroidism / Myxedema / Autoantibodies |
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| 研究概要 |
バセドウ病や甲状腺機能低下症の一部では抗TSH受容体抗体(TRAb)が発症や病態形成に直接的に関与しており、これらの抗体における免疫グロブリン遺伝子の解析は同病の病態・病因研究にとって極めて重要である。そこで、我々は、平成5年度にバセドウ病TSH受容体抗体産生B細胞クローンの作成し、免疫グロブリンVH遺伝子の単離と解析を行なったが、平成6年度においては、同クローンのVκ遺伝子も解析した。さらに原発性甲状腺機能低下症患者からも抗TSH受容体抗体産生クローンを単離し、そのVHおよびVκ遺伝子について解析中である。
1.バセドウ病TSH受容体抗体Vκ遺伝子の検討:B細胞クローンから、VκのcDNAを単離して、その塩基配列を検討した。その結果、VH遺伝子と同様に、限られた種類の未分化Vκ遺伝子断片がVκ領域に用いられていた。さらに、単離した抗体はすべてIgM型ながら、すべてのVκ領域に体細胞突然変異が認められ、その頻度や部位が抗体活性に重要と考えられた。
2.原発性甲状腺機能低下症患者からのTSH受容体抗体産生B細胞クローンの作成と免疫グロブリン遺伝子の解析:3例の患者の末梢血リンパ球をEB virusでtransformし、バセドウ病の場合と同様にTSH受容体抗体産生B細胞クローンを得た。すなわち、20のTBII(結合阻害型抗体)クローンを得たが、すべてのクローンがTSBAb(生物学的抑制抗体)であった。他に、TBII陰性・TSBAb陽性2クローンを得た。予備的ではあるが、これらのうち、6クローンのVH・Vκ遺伝子を単離・解析した。その結果、バセドウ病クローンと同様に限られた種類の未分化VH・Vκ遺伝子断片の使用や、VH・Vκ領域でのsomatic mutationが認められた。以上の研究から、TSH受容体抗体遺伝子の一次構造が明らかとなり、VH・Vκ遺伝子断片の限定使用や、VH・Vκ領域での sonatic mutationの抗体活性における重要性が示された。
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