SECレセプターの単離、構造解析および機能発現機序の解明

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 05780436
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 武谷 浩之 三重大学, 医学部, 助手 (60222105)
• キーワード: アンチトロンビン / トロンビン / 単球 / レセプター / セルピン / 炎症 / 血液凝固 / プロテアーゼ

研究概要

アンチトロンビンIII(ATIII)はトロンビンと1:1の複合体を形成して活性を阻害する血液凝固系の制御調節因子であり、トロンビン・ATIII複合体(TAT)は炎症や血管内皮細胞障害に伴う凝固亢進状態で著明に増加する。我々は血管内皮細胞障害部位で多量のTATと単球が近接して存在すると示唆されることから、TATと単球との相互作用について研究してきた。その結果、TATは単球系樹立細胞U937に特異的かつ飽和的に結合することを明らかにした。この結合は非常に速い反応であり、5分後には最大結合量の80%が結合しており、30分後には最大結合量に達した。この結合は非標識TATで強く阻害されたが、ATIIIおよびトロンビンでは阻害されなかった。ATIIIはU937細胞に結合しなかった。また、Perlmutterらが肝癌細胞HepG2上に同定したSEC(Serpin-Enzyme Complex)レセプターの認識アミノ酸配列に基づく合成ペプチド(alpha1アンチトリプシン・359-374)はU937細胞にも特異的かつ飽和的に結合し、同レセプターの存在が示唆された。一方、このペプチドはTATのU937細胞への結合を阻害せず、TATレセプターとPerlmutterらの同定したSECレセプターとは異なる物質であることが判明した。レセプターに結合したTATは細胞内に取り込まれ、リソゾームで分解された。現在TATレセプターおよびSECレセプターの精製が進行中であり、また、TATのU937細胞の機能への影響について検討中である。

研究成果

• [文献書誌] Takeya,H.,Nishino,N.,Miyata,T.,Omori-Satoh,et al.: "Snake Venom Hemorrhagic and Non-hemorrhagic Metalloendopeptidases" Methods Enzymol.223. 365-378 (1993)
• [文献書誌] Honda,S.,Morohashi,K.,Nomura,M.,Takeya,H.,et al.: "Ad4BP Regulating Steroidogenic P-450 Gene is a Member of Steroid Hormone Receptor Superfamily" J.Biol.Chem.268. 7494-7502 (1993)
• [文献書誌] Takeya,H.,Nishida,S.,Nishino,N.,Makinose,Y.,et al.: "Primary Structures of Platelet Aggregation Inhibitors(Disintegrins)Autoproteolytically Released from Snake Venom Hemorrhagic Metalloproteinases" J.Biochem.108. 711-719 (1993)
• [文献書誌] Hessing,M.,Kanters,D.,Takeya,H.,van't Veer.C.,: "The Region Ser333-Arg356 of the alpha-Chain of Human C4b-Binding Protein Is Involved in the Binding of Complement C4b" FEBS Lett.108. 228-232 (1993)
• [文献書誌] 武谷浩之、鈴木宏治: "アンチトロンビンIIIの構造と機能:最近の進歩" 血液・腫瘍科. 28. 93-100 (1994)
• [文献書誌] 武谷浩之、鈴木宏治: "動脈硬化症発症研究の進歩-血液凝固・線溶系機能" 日本臨床. 51. 1998-2003 (1993)
• [文献書誌] Iwanaga,S.,Takeya,H.: "Methods in Protein Sequence Analysis(Structure and Function of Snake Venom Metalloproteinase Family)" Plenum Press,New York(Imahori,K.,akiyama,F.,eds), 310(9) (1993)