カイコ突然変異体を利用した昆虫生化学研究の推進

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06044175
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 藤井 博 九州大学, 農学部, 助教授 (10038268)
• 研究分担者: LAW John H. アリゾナ大学, 生化学部・評議員, 教授 ; WELLS Michae アリゾナ大学, 生化学部・部長, 教授 ; 土田 耕三 国立予防衛生研究所, 主任研究官 (40231435) ; 前川 秀彰 国立予防衛生研究所, 室長 (60100096) ; 角田 素行 京都工芸繊維大学, 繊維学部, 助教授 (50127164) ; 小林 正彦 東京大学, 農学部, 教授 (60162020) ; 鈴木 昭憲 東京大学, 農学部, 教授 (90011907) ; 土井良 宏 九州大学, 農学部, 教授 (30038210)
• キーワード: カイコ / 中腸組織 / 突然変異系統 / カロチノイド透過性 / 人口試料 / cDNAライブラリー / カロチノイド結合タンパク質

研究概要

1.カロチノイド結合タンパク質を中腸及び絹糸腺からカロチノイド結合タンパク質を種々のクロマトグラフィ法を用いて精製分離した。
wellsの研究室において分子量40KDaのタンパク質を分離した。このタンパク質はルテイン色素を結合していた。藤井は分子量600KDaのタンパク質を中腸組織から分離した。また中腸組織には600KDa以外にこれよりも低分子量のカロチノイド色素を結合したタンパク質が存在することを明かにしたが、分離することができなっかた。一方絹糸腺からカロチノイド結合タンパク質を分離には成功しなかった。
2.体液カロチノイド結合タンパク質に対する抗体と中腸組織から精製したカロチノイド結合タンパク質(600KDa)と反応させたとこら、共通の抗原性の存在することが明かとなった。一方600KDaよりも小さいカロチノイド結合タンパク質とは反応しなかった。この結果600KDaのものとは異なったカロチノイド結合タンパク質分子の存在が明かとなった。
3.中腸組織からcDNAライブラリーを作成し、抗体を用いてカロチノイド結合タンパク質遺伝子のクローニングを行っている。
4.カロチノイド結合タンパク質の生化学的性質を明らかにした。すなわち藤井が既に分離精製している黄血体液中のカロチノイド結合タンパク質と中腸組織中のそれとは免疫学的には同じであった。また糖および脂質を有する糖脂質複合タンパク質であった。
5.カロチノイド透過性に関する突然変異系統の人工試料を用いた飼育及び系統保存システムについてアリゾナ大学Law教授並びにWells教授の研究室で指導した。

研究成果

• [文献書誌] Fujii Hiroshi: "Haemolymph protein profiles in allatectomy-induced trimolters resembie those of a recessive trimolting mutant of the silkwworm,Bombyx mori" Comp.Biochem.Physiol.,. 107B. 579-584 (1994)
• [文献書誌] Sumida Motoyuki: "Sucrose activity and its kinetic properties in peritrophic membrane,and in membrane-bound and soluble fractions of midgut in the silkworm,Bombyx mori" Comp.Biochem.Physiol.,. 108A. 255-264 (1994)
• [文献書誌] Sumida Motoyuki: "Purification and some properties of soluble beta-fructofuranosidase from larval midgut of the silkworm,Bombyx mori" Comp.Biochem.Physiol.,. 107B. 273-284 (1994)
• [文献書誌] Michael A.Wells: "Cloning and sequencing of the early trypsin gene from Ades aegypti." Insect Moiec.Biol.,. in press. (1994)
• [文献書誌] Michael A.Wells: "cDNA sequence of an elastase-like protein from the midgut of larval Manduca sexta." Insect Molec.Biol.,. in press. (1994)
• [文献書誌] 小林正彦: "ポリメラーゼ連鎖反応による飼育残沙を含めた大量試料からの核多角体病蚕の検出" 日本蚕糸学雑誌. 63. 392-398 (1994)