1994 年度実績報告書

抗HIV活性をもつ機能性アンチセンスDNAの合成とその作用機序

研究課題

研究課題/領域番号	06255103
研究機関	千葉工業大学
研究代表者	高久洋千葉工業大学, 工学部, 教授 (50101267)
研究分担者	高井和幸千葉工業大学, 工学部, 助手 (40260848) 中島秀喜山梨医科大学, 医学部, 助教授 (20192669)
キーワード	ホスホロチオエ-トオリゴマー / アンチセンスDNA / ホスホリピドDNA / 逆転写酵素 / 抗HIV活性 / 構造タンパク質遺伝子 / 逆転写酵素阻害能
研究概要	今日まで不明であったアンチセンスDNAの作用機序を明らかにすることができた。すなわち、その逆転写酵素の種類によってホスホロチオエ-ト型DNAと強く相互作用することが明らかになった。しかし、HIV-1の逆転写酵素はS-ODNsとは全く相互作用することなく、mRNAに結合して遺伝子発現制御をすることから、アンチセンス機能をもった抗HIV剤として期待できることがわかった。一方、アンチセンスDNAにさらに高い機能をもたせるために、細胞膜透過性機能物質をアンチセンスDNAに導入することが考えられ、膜透過性物質としてのホスホリピドをDNAに導入したところ、非常に高い抗HIV活性を示した。しかし、ホモポリマー、ランダム、センス、オリゴマーでもアンチセンスDNAにホスホリピドを導入した物質と同程度の活性を示したことから、逆転写酵素活性を阻害することで抗HIV活性を示しているものと思われる。さらに、ロングタ-ムによりアンチセンスDNAの抗HIV活性を測定したところ、標的遺伝子としてはtat、revよりもgag領域が高い活性を示したことから、標的遺伝子としては構造タンパク質遺伝子の領域が最適領域となることがわかった。以上、我々はアンチセンスDNAが抗HIV剤として利用できる可能性を明らかにした。

研究成果
(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Sang Gug Kim: "Antiviral Effect of Oligodeoxyribonucleotide Complementary to Human Immunodeficiency Virus." Bioorganic & Medical Chem.(in press).
[文献書誌] Masamitsu Shimada: "Specificy of priming reaction of HIV-1 reverse transcriptase,2′-OH or 3′-OH." J.Biol.Chem.264. 3925-3927 (1994)
[文献書誌] Hideki Nakashima: "Anti-human immundeficiiency virus type 1 activity of phosphorothioate analogs of oligo-deoxynucleotides;penetration and localization of oligo-deoxynucleotides in HIV-1-infected MOLT-4 cells." Nucleic Acids Res.22. 5004-5010 (1994)
[文献書誌] Miyano-Kurasaki,N.: "A novel assay system for anti-human uno-deficiency virus type 1(HIV-1)activity using a subclone of a monocytic cell line U937." J.Immunol.Microbiol.38. 813-818 (1994)
[文献書誌] Kazuyuki Takai: "Recognition of UUN Codons by two Leucine tRNA Species from Escherichia coli." FEBS Letters. 344. 31-34 (1994)
[文献書誌] Takahiro Hohsaka: "Site-specific incorporation of photofunctional nonnatural amino acids into a polypeptide through in vitro protein biosynthesis." FEBS Letters. 344. 171-174 (1994)
[文献書誌] Hiroshi Takaku: "Anti-HIV Activity and Mechanism of Unmodified and Modified Antisense Ologonucleotides.in Carbohydrate Modifications in Antisense Research(eds by Sanghvi,Y.S.and Cook,P.D.)" ACS Books Dept., 232 (1994)
[文献書誌] Hiroshi Takaku: "Inhibition of Gene Expression by Antisense DNA." Tanpaku Kakusan Koso, 2866 (1994)

1994 年度 実績報告書

抗HIV活性をもつ機能性アンチセンスDNAの合成とその作用機序

研究代表者

高久 洋 千葉工業大学, 工学部, 教授 (50101267)

研究成果

[文献書誌] Sang Gug Kim: "Antiviral Effect of Oligodeoxyribonucleotide Complementary to Human Immunodeficiency Virus." Bioorganic & Medical Chem.(in press).

[文献書誌] Masamitsu Shimada: "Specificy of priming reaction of HIV-1 reverse transcriptase,2′-OH or 3′-OH." J.Biol.Chem.264. 3925-3927 (1994)

[文献書誌] Hideki Nakashima: "Anti-human immundeficiiency virus type 1 activity of phosphorothioate analogs of oligo-deoxynucleotides;penetration and localization of oligo-deoxynucleotides in HIV-1-infected MOLT-4 cells." Nucleic Acids Res.22. 5004-5010 (1994)

[文献書誌] Miyano-Kurasaki,N.: "A novel assay system for anti-human uno-deficiency virus type 1(HIV-1)activity using a subclone of a monocytic cell line U937." J.Immunol.Microbiol.38. 813-818 (1994)

[文献書誌] Kazuyuki Takai: "Recognition of UUN Codons by two Leucine tRNA Species from Escherichia coli." FEBS Letters. 344. 31-34 (1994)

[文献書誌] Takahiro Hohsaka: "Site-specific incorporation of photofunctional nonnatural amino acids into a polypeptide through in vitro protein biosynthesis." FEBS Letters. 344. 171-174 (1994)

[文献書誌] Hiroshi Takaku: "Anti-HIV Activity and Mechanism of Unmodified and Modified Antisense Ologonucleotides.in Carbohydrate Modifications in Antisense Research(eds by Sanghvi,Y.S.and Cook,P.D.)" ACS Books Dept., 232 (1994)

[文献書誌] Hiroshi Takaku: "Inhibition of Gene Expression by Antisense DNA." Tanpaku Kakusan Koso, 2866 (1994)

1994 年度実績報告書

高久洋千葉工業大学, 工学部, 教授 (50101267)