1994 年度実績報告書

神経毒のニューロン死機構:アポトーシスの関与と新規神経由来因子の防御作用

研究課題

研究課題/領域番号	06272203
研究機関	北海道大学
研究代表者	野村靖幸北海道大学, 薬学部, 教授 (00034041)
キーワード	ニューロン死 / 神経毒 / 細胞内機構 / アポトーシス / NO / LPS
研究概要	培養C6グリオーマ細胞において、エンドトキシン(LPS)とインターフェロンγ(IFN-γ)を同時刺激することによって誘導型NO合成酵素(iNOS)が発現することを見い出した。その詳細な情報伝達機構を解析するため種々検討した。この二つの薬物によるiNOSの誘導はチロシンキナーゼ阻害薬であるハービマイシンAで抑制されたことから、蛋白質リン酸化が必要であることがわかった。IFN-γはJAK2キナーゼの自己リン酸化(チロシン残基)を引き起こしたが、このリン酸化はハービマイシンAによって抑制されなかった。一方、LPSは核内転写因子のNF-kBの活性化を引き起こした。この活性化はiNOS誘導を抑制する濃度のハービマイシンAで抑制された。また、LPS刺激は低分子量GTP結合蛋白質のRasを不活性型(GDP型)から活性型(GTP型)にさせた。さらに、この活性化に伴うmitogen-activated protein kinase(MAPK)の活性化をも引き起こした。この活性化にもチロシンキナーゼが関与していることから、このカスケードも酵素誘導に関与している可能性が示唆された。次に、NOドナー(sodium nitroprusside(SNP),S-nitroso-N-acetylpenicillamine (SNAP))をニューロンモデル細胞(PC12細胞やNG108-15細胞)に作用させると、細胞死の指標の一つである乳酸デヒドロゲナーゼ(LDH)の漏出がおこった。さらには、NG108-15細胞では同時にDNAの断片化も見られた。このことから、NOは細胞死を引き起こすことがわかった。SNPはglyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase(GAPDH)とNADとの反応(GAPDHの修飾)を亢進させ、活性の低下をも引き起こした。このGAPDHの阻害薬であるkoningic acidをNG108-15細胞に作用させるとLDH漏出が起こったことから、NOによる細胞死のメカニズムの一つにGAPDHが関与することが示唆された。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Yoshihisa Kitamura: "Suppressive effect of FK-506,a novel immunosuppressant,against MPTP-induced dopamine depletion in the striatum of young C57BL/6 mice" Journal of Neuroimmunology. 50. 221-224 (1994)
[文献書誌] Michihisa Tohda: "Distinct induction of c-fos mRNA in NG108-15 cells transfected with muscarine m1 and m3 receptors" European Journal of Pharmacology. 268. 169-176 (1994)
[文献書誌] Yasuhiro Itano: "1-Methyl-4-phenylpyridinium(MPP+)-induced cell death in PC12 cells:Inhibitory effects of several drugs" Neurochemistry International. 25. 419-424 (1994)
[文献書誌] Takashi Uehara: "Possible involvement of protein kinase C and low molecular weight GTP-binding proteins in thrombin-induced histamine secretion in human" Biochemical and Biophysical Research Communications. 206. 492-496 (1994)
[文献書誌] Yoshihisa Kitamura: "Inhibition by pentamidine on constitutive nitric oxide synthase in the brain:as a calmodulin antagonist" European Journal of Pharmacology. (in press). (1995)
[文献書誌] 北村佳久: "NOシンターゼ" 「脳特異的蛋白質、接着蛋白質」蛋白質化学. (印刷中). (1995)
[文献書誌] 野村靖幸: "脳機能の解明" 脳の老化-神経細胞死と記憶障害-, 7 (1994)
[文献書誌] 野村靖幸: "最新医学からのアプローチ 13 NO" グリアでのNO産生とニューロン死(印刷中), (1995)

1994 年度 実績報告書

神経毒のニューロン死機構:アポトーシスの関与と新規神経由来因子の防御作用

研究代表者

野村 靖幸 北海道大学, 薬学部, 教授 (00034041)

研究成果

[文献書誌] Yoshihisa Kitamura: "Suppressive effect of FK-506,a novel immunosuppressant,against MPTP-induced dopamine depletion in the striatum of young C57BL/6 mice" Journal of Neuroimmunology. 50. 221-224 (1994)

[文献書誌] Michihisa Tohda: "Distinct induction of c-fos mRNA in NG108-15 cells transfected with muscarine m1 and m3 receptors" European Journal of Pharmacology. 268. 169-176 (1994)

[文献書誌] Yasuhiro Itano: "1-Methyl-4-phenylpyridinium(MPP+)-induced cell death in PC12 cells:Inhibitory effects of several drugs" Neurochemistry International. 25. 419-424 (1994)

[文献書誌] Takashi Uehara: "Possible involvement of protein kinase C and low molecular weight GTP-binding proteins in thrombin-induced histamine secretion in human" Biochemical and Biophysical Research Communications. 206. 492-496 (1994)

[文献書誌] Yoshihisa Kitamura: "Inhibition by pentamidine on constitutive nitric oxide synthase in the brain:as a calmodulin antagonist" European Journal of Pharmacology. (in press). (1995)

[文献書誌] 北村佳久: "NOシンターゼ" 「脳特異的蛋白質、接着蛋白質」蛋白質化学. (印刷中). (1995)

[文献書誌] 野村靖幸: "脳機能の解明" 脳の老化-神経細胞死と記憶障害-, 7 (1994)

[文献書誌] 野村靖幸: "最新医学からのアプローチ 13 NO" グリアでのNO産生とニューロン死(印刷中), (1995)

1994 年度実績報告書

野村靖幸北海道大学, 薬学部, 教授 (00034041)