マウス発生工学を用いた核内レセプターRXRの機能解析

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06281215
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 宮崎 純一 東北大学, 加齢医学研究所, 教授 (10200156)
• 研究分担者: 田代 文 東北大学, 加齢医学研究所, 助手 (40136213)
• キーワード: 核内レセプター / トランスジェニックマウス / 胸腺 / T細胞 / 分化 / 肝臓

研究概要

個体発生や細胞分化に重要な役割を果たす考えられるレチノイン酸(RA)や甲状腺ホルモン、ビタミンDは核内レセプターファミリーに属する特異的なレセプターに結合し、レチノイドXレセプター(RXR)とヘテロ二量体を構成し転写制御を行う。RXRβのC末端を欠失させることにより、ヘテロ2量体形成能・DNA結合能は保たれるが転写を強く抑制するRXRが作られる。このdominant negative変異RXRを発現させることにより、これらの核内受容体を不活化することができると考えられる。dominant negativeRXRβをコードするcDNAを肝臓特異的SAPプロモーター、胸腺特異的1ckプロモーターの下流に結合した融合遺伝子を作製した。これをC57BL/6マウスの受精卵にマイクロインジェクション法により導入し、各々、13匹、7匹のトランスジェニックマウスを得た。これらのトランスジェニックマウスの肝臓、胸腺におけるRXRの発現を検討し、発現の最もよいトランスジェニックマウスを選び、繁殖させた。SAP-RXRトランスジェニックマウスについては、肝臓の切片の観察で肝細胞の増殖像が散見された。1ck-RXRトランスジェニックマウスについては胸腺の肥大を示すものがいた。今後、SAP-RXRトランスジェニックマウスについてはクロフィブレートなどのペルオキシゾーム増殖剤をマウスに投与したときの肝臓の変化(ペルオキシゾームの増加など)を病理学的に調べる。クロフィブレートは肝臓の化学発癌剤としても作用するので、投与時の肝発癌の率を正常マウスと比較する。1ck-RXRトランスジェニックマウスについては、胸腺におけるT細胞の分化(特に、CD/48 double positiveからsingle positive T細胞への分化)を検討する。

研究成果

• [文献書誌] Ishihara,H: "Overexpression of hexokinase I but not GLUT1 glucose transporter alters concentration-dependency of glucose-stimulated insulin secretion in pancreatic b-cell line MIN6." J Biol Chem. 269. 3081-3089 (1994)
• [文献書誌] Nishiyama,N: "Expression of the gene encoding the tyrosine-kinase deficient human insulin receptor in transgenic mice." Gene. 141. 187-192 (1994)
• [文献書誌] Inagaki,N: "Cloning and functional characterization of a third PACAP receptor subtype expressed in insulin-secreting cells." Proc Natl Acad Sci USA. 91. 2679-2683 (1994)
• [文献書誌] Gonoi,T: "Functional neuronal ionotropic glutamate receptors are expressed in the non-neuronal cell line MIN6." J Biol Chem. 269. 16989-16992 (1994)
• [文献書誌] Goodison,S: "Response to glucose of transcription factor binding to the rat insulin-I gene promoter." Biochem Biophys Res Commun. 203. 702-710 (1994)
• [文献書誌] Koike,M: "Defective IL-5R-receptor-mediated signaling in B cells of X-linked immunodeficient mice." Int Immunol. 7. 21-30 (1995)