がん遺伝子の単離とヒトがんにおける異常の解明

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06283207
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 渋谷 正史 東京大学, 医科学研究所, 教授 (10107427)
• 研究分担者: 後藤 典子 東京大学, 医科学研究所, 助手 (10251448) ; 丸 義朗 東京大学, 医科学研究所, 助手 (00251447)
• キーワード: シグナル伝達 / がん関連遺伝子 / 受容体型チロシンキナーゼ / Flt / VEGF / EGFR

研究概要

1.Flt-1チロシンキナーゼの解析.
本年度は血管形成すなわち内皮細胞の増殖と分化に関与する受容体型チロシンキナーゼに関して主に解析した。
(1).内皮増殖因子VEGFはFlt-1とKDRの2つの受容体を活性化し、強い増殖刺激と血管透過性を引き起こすが、VEGF関連のPIGFはFlt-1のみを活性化し、生物学的活性も弱いことを見い出した。
(2).VEGFの受容体の1つKDRをNIH3T3細胞に強発現させ、シグナル伝達を解析した。その結果、VEGF添加により、KDRの自己リン酸化とPLCγのへのチロシンリン酸化は速やかに生じるが、MAPキナーゼの活性化は極めておそい反応しか認められず、内皮細胞は特異的なシグナル伝達系をもつことが示唆された。
(3).ヒトのバセドウ病のモデル系をラットで作成し、甲状腺の腫脹に伴ってVEGF、Flt-1、KDRのmRNAが一過性に上昇し、血管新生 引き起こすことを明らかにした。
(4).Flt-1チロシンキナーゼが内皮細胞特異的に発現する機構につき、転写調節に関して検討した。flt-1遺伝子上流にETSモチーフとCRE配列が存在し、両者が共同して転写レベルの活性化を行うことを明らかにした。
2.EGF受容体チロシンキナーゼの解析.
細胞増殖のシグナル伝達に関し、EGF受容体をモデル系として検討した。
(1).EGF受容体からRasに至るシグナル伝達にShcが重要であることを明らかにしたので、Shcのチロシンリン酸化部位を解析した。その結果、317Yが強くチロシンリン酸化を受ける部位であることが明らかとなった。
(2).血球系細胞をもちいた解析により、Shcからc-mycへ至るシグナル伝達経路の存在を示唆する結果を得た。

研究成果

• [文献書誌] Seetharam,L.: "A unique signal transduction from FLT tyrosine kinase,a receptor for vascular endothelial growth factor VEGF." Oncogene. 10. 135-147 (1995)
• [文献書誌] Shibuya,M: "Role of VEGF-Flt receptor system in normal and tumor angiogenesis." Adv.Cancer Res.67. 281-316 (1995)
• [文献書誌] Maru,Y.: "Tyrosine phosphorylation of BCR by FPS/FES protein-tyrosine kinases induces association on BCR with GRB2/SOS" Mol.Cell.Biol.15. 835-842 (1995)
• [文献書誌] Cohen,T.: "VEGF_<121>,a VEGF isoform lacking heparin binding ability,requires cell surface heparin-sulfates for effecient・・・" J.Biol.Chem.270. 11322-11326 (1995)
• [文献書誌] Sato,K.: "Stimulation by TSH and Graves′IgG of vascular endothelial growth factor mRNA expression in human thyroid・・・" J.Clin.Invest.96. 1295-1302 (1995)
• [文献書誌] Sawano,A.: "Flt-1 but not KDR/Flk-1 tyrosine kinase is a receptor for Placenta Grtowth Factor(PIGF),which is related・・・21GC06:Cell Growth and Differentiation" (in press). (1995)