FISH法によるがん悪性度判定法の開発

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06283223
• 研究機関: 京都府立医科大学
• 研究代表者: 稲澤 譲治 京都府立医科大学, 医学部, 講師 (30193551)
• 研究分担者: 三澤 信一 京都府立医科大学, 医学部, 講師 (40117908) ; 嘉数 直樹 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (20264757)
• キーワード: FISH法 / がん / 染色体異常 / 遺伝子診断

研究概要

FISH法の技術改良を行うとともにFISH法により、微量がん細胞の間期核を対象に染色体・遺伝子異常診断法を開発し、FISHによるがん悪性度判定システムを完成させ、実地の臨床に応用可能ながん診断法を確立することを目的に研究を実施した。結果、伸展プロフェーズ染色体、DNAファイバーを材料に高解像FISHゲノム解析システムを確立した。本システムでは、オーバーラップするクローンから染色体レベルの距離にあるクローンまでの配列決定が行え、癌特異的染色体転座切断点や癌抑制遺伝子単離に向けて強力なゲノム解析ツールの一つとなる。さらに、神経膠腫の中で、第1番染色体短腕1p36の欠失がoligodendroglioma(OL)に特異的に出現し、1pにOLの癌抑制遺伝子が存在することを明らかにした。また、乳癌、尿路系腫瘍(腎盂、尿管、膀胱癌)を対象に、針穿刺吸引細胞や尿中に脱落する細胞を材料に日常のがん臨床に応用可能なFISH法がん診断技術を確立することができた。本手技による診断は現状の病理細胞診によるがん診断の精度をはるかに凌ぐものであり、乳癌では、解析全例でがん診断が可能であった。また膀胱洗浄液、自然尿中の細胞を試料に移行上皮癌細胞で第8番染色体長腕の過剰が高頻度に出現することを明らかにし、本異常を指標に尿中の癌細胞を高感度に同定できることを示した。

研究成果

• [文献書誌] Inazawa,J.et al.: "High resolution ordering of DNA markers by multi-color fluorescent in situ hybridization of prophase chromosomes." Cytogent Cell Genet.65. 130-135 (1994)
• [文献書誌] Matozaki,T.et al.: "Molecular cloning of a human transmembrane type protein tyrosine phosphatase and its expression in gastrointestinal cancers." J Biol Chem. 269. 2075-2081 (1994)
• [文献書誌] Yoshiura,K.et al.: "Mapping of the 8q23 translocation breakpoint of t(8;13)observed in a patient with multiple exostosies." Genes Chromosome.Cancer.9. 57-61 (1994)
• [文献書誌] Isomura,M.et al.: "Detailed analysis of loss of heterozygosity on chromosome band 17p13 in breast carcinoma on the basis of a high-" Gene Chromosome Cancer. 9. 173-179 (1994)
• [文献書誌] Ariyama,T.et al.: "High-resolution cytogenetic map of the short arm of chromosome 1 with newly isolated 411 cosmid markers by" Genomics. 25. 114-123 (1995)
• [文献書誌] Ariyama,T.: "Precise ordering of 26 cosmids markers on 3p21.3-p23 by multicolor fluorescence in situ hybridization on prophase" Cytogent Cell Genet. (印刷中).
• [文献書誌] 野村慎太郎・稲澤譲治: "脱アイソトープ実験プロトコールDIGハイブリダイゼーション" 秀潤社, 138 (1994)
• [文献書誌] 稲澤譲治: "FISH実験プロトコール" 秀潤社、松原謙一・吉川寛監修, 220 (1994)