細胞増殖シグナルにおけるPIP_2、PIP_3結合蛋白の役割

1996 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06404022
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 竹縄 忠臣 東京大学, 医科学研究所, 教授 (40101315)
• 研究分担者: 深見 希代子 東京大学, 医科学研究所, 助手 (40181242)
• キーワード: α-アクチニン / PIP_2 / PHドメイン

研究概要

1.新しいPIP_2結合蛋白質としてのヒストン
我々は、ヒストンH_1およびH_3にPIP_2が結合していることを見つけ、結合部位を決定した。PIP_2はヒストンH_1のC末103アミノ酸に結合した。ヒストンH_1に結合しているPIP_2量は、PKCでヒストンH_1をリン酸化させると結合しているPIP_2は減少した。またPIP_2の添加により、ヒストンH_1によるRNAポリメラーゼによる基本転写活性の抑制が解除された。
2.チロシンキナーゼの下流にあるPIP_2ホスファターゼ
我々は、牛脳よりAsh/Grb2に結合する150kDaの蛋白質を精製し、そのcDNAをクローニングした。p150はシナプトジャニンと相同性の高い蛋白質であった。p150を細胞に発現させるとアクチン線維の断裂が生じ、多核の細胞になった。p150蛋白質を牛脳より精製し、その性質を調べた。PIP_2ホスファターゼ活性はプロフィリン、コフィリン、α-アクチニンの様なアクチン調節蛋白質で阻害されないが、PLC-δ_1の活性は阻害された。これらの結果は、p150はアクチン調節蛋白質に結合しているPIP_2を分解し、その結果アクチン線維の再構築を促していることを示した。

研究成果

• [文献書誌] K.Fukami,et al: "Identification of a PIP_2 binding site in chicken skeletal muscle α-actinin" J.Biol.Chem.271. 2646-2650 (1996)
• [文献書誌] S.Moriya,et al: "PDGF activates protein kinase C ε through redundant and indedundant signaling pathway involving phospholipase C γ or phosphatidylinositol 3-kinase" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 93. 151-155 (1996)
• [文献書誌] K.Miura,et al: "Interaction of Ash/Grb2 via its SH3 domains with neuron-specific p150 and p65" Biochem.J.316. 639-645 (1996)
• [文献書誌] M.Matsuda,et al: "Interaction between the amino-terminal SH3 domain of Crk and its natural target proteins" J.Biol.Chem.271. 14468-14472 (1996)
• [文献書誌] H.Miki,et al: "A novel actin-depolymerizing protein N-WASP regulates thecor-tical cytoskeletal rearrangement in a PIP_2 dependent manner at the downstream of tyrosine kinase" EMBO J.15. 5326-5335 (1996)
• [文献書誌] T.Ito,et al: "β-Tubulin binds Src homorogy 2 domains through a region different from the tyrosinephosphorylated protein-recognizing site" J.Biol.Chem.271. 27931-27935 (1996)