| 研究課題/領域番号 |
06404033
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| 研究種目 |
一般研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
循環器内科学
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
北畠 顕 北海道大学, 医学部, 教授 (00124769)
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| 研究分担者 |
及川 恒之 (財)佐々木研究所, 細胞遺伝部, 部長 (80150241)
岡本 洋 北海道大学, 医学部・附属病院, 助手 (50260394)
川口 秀明 北海道大学, 医学部, 教授 (70161297)
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1995
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| キーワード | 心肥大 / 組織レニン・アンジオテンシン系 / トランスジェニックマウス / 心不全 / 遺伝子多型性 / 心筋症ハムスター / アンジオテンシノーゲン / アンジオテンシン変換酵素 |
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| 研究概要 |
研究の背景と目的;近年、心肥大発生のメカニズムとしてα受容体、アンジオテンシンII受容体あるいは機械的な進展刺激が注目されている。これらは、受容体を介してイノシトールリン脂質-ホスホリパーゼC(PLC)系あるいはadenylyl cyclase系の細胞膜情報伝達系により制御され、細胞内に刺激が伝達される。中でも、心筋組織レニン・アンジオテンシン系はパラクライン-オートクライン機構により筋細胞肥大や間質の線維化に関与すると考えられるがその詳細な機序は解明されていない。それは、心筋組織内ではいわゆるレニン・アンジオテンシン系以外にもアンジオテンシンIIを産生する系が存在、あるいは循環血液中に増加したアンジオテンシンIIが血圧上昇を介して心肥大を引き起こす機序も考えられるからである。そこで、本研究の目的は心筋肥大発止機序および心筋障害促進機序を解明するために、心筋組織RA系因子(レニン、アンジオテンシノーゲン、アンジオテンシン変換酵素)を心筋特異的プロモーターに結合させたgeneをマウス卵細胞にtransfectionし、transgenic mouseを作製し心筋組織内RA系の発現様式を変化させ、心筋組織RA系の心肥大における独立した役割を明らかにすることにある。本年度、肥大型心筋症における心肥大発症にレニン-アンジオテンシン系遺伝子ことに,アンジオテンシノーゲン、アンジオテンシン変換酵素遺伝子の関与を示した。また、実験的心肥大モデルにおいて組織レニン-アンジオテンシン系遺伝子発現の亢進を示し、in vitroの系におけるアンジオテンシンII細胞内情報伝達系を明らかにし、G蛋白質による細胞機能制御機構やレニン-アンジオテンシン系遺伝子組み込みによる細胞機能変化を検討した。また、レニン-アンジオテンシン系遺伝子トランスジェニック動物作製の試み心筋に特異的にRA系遺伝子を発現させるために心筋特異的に発現させるためミオシン遺伝子のプロモーター領域を増幅することに成功した。さらに、Eμの発現ベクターにACE遺伝子を組み込み、培養線維芽細胞、大動脈内皮細胞にトランスフェクションしACE活性、ACEmRNA発現を確認した。また、ACE遺伝子をin vivoでトランスフェクションするためにアデノウイルスベクター系の作製に成功した。今後さらに、ミオシン遺伝子のプロモーターにレニン、アンジオテンシン変換酵素DNAを結合させ、それぞれの遺伝子を有するtransgenic mouseの作製を試みる予定である。
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