| 研究課題/領域番号 |
06404047
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
胸部外科学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
松田 暉 大阪大学, 医学部, 教授 (00028614)
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| 研究分担者 |
谷口 和博 大阪大学, 医学部, 助手 (90171842)
金田 安史 大阪大学, 細胞生体工学センター, 助教授 (10177537)
澤 芳樹 大阪大学, 医学部, 助手 (00243220)
白倉 良太 大阪大学, 医学部, 教授 (00116047)
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1996
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| キーワード | 遺伝子導入 / 心筋保護法 / 虚血再灌流障害 / 心保存 / 熱ショックプロテイン / DNA組換え |
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| 研究概要 |
心筋虚血再灌流に対する耐性獲得のためにこれまで数多くの心筋保護液や薬剤投与などのpharmacologicaltherapyが試みられてきたが、いずれも効果に限界があり最近ではさらなる虚血耐性の獲得をめざしischemic Preconditioningやheat Shockなどのself-preservation能力の応用が注目されている。本研究ではDNA組み換え技術を応用して心臓に遺伝子導入を行なうことにより、心筋における強力なself-preservation preoteinのひとつであるheat shock protein 70 (HSP70)を心筋内部から過剰発現させそれにより心筋保護効果を獲得する(長時間心保存法を確立する)ことをめざした。まずさまざまな条件のheat shockによりHSP70を発現させるとともに、その心筋保護効果を詳細に検討した。次いでHSP70のcDNAを作成し発現ベクターに組み込み、単離培養した心筋細胞、血管内皮細胞それぞれにHVJ-liposome法にてこの遺伝子をin vitroで遺伝子導入した。その結果いずれの細胞においてもHSP70が過剰発現し、低酸素再酸素化障害に対する耐性が獲得されることを示した。さらに心臓への高高率なin vivoの遺伝子導入法として、HVJ-liposomeの冠動脈内注入法を開発しその最適な条件を設定した。この方法にてHSP70を心筋にin vivo遺伝子導入した結果、心筋全体に細胞障害なく高効率にHSP70が高度発現し、遺伝子導入により高度発現したHSP70は心筋虚血再灌流障害に対し通常のheat shockの効果よりも優れた耐性を示しうることが示された。即ち心保存中ドナー心にHSP70の遺伝子導入を行い虚血耐性を向上させることによって長時間の心保存が実現しうる可能性が示唆された。
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