研究課題/領域番号 |
06454032
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研究種目 |
一般研究(B)
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配分区分 | 補助金 |
研究分野 |
系統・分類
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研究機関 | 東邦大学 |
研究代表者 |
河野 晴一 東邦大学, 理学部, 教授 (70057644)
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研究分担者 |
片倉 正樹 弘前大学, 理学部, 助手 (50261425)
池部 千賀子 東邦大学, 薬学部, 講師 (30112907)
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研究期間 (年度) |
1994 – 1995
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キーワード | Pseudohynobius tsinpaensis / Pseudohynobius flavomaculatus / Batrachuperus pinchonii / Ranodon shihi / 系統・分類 / 染色体バンド法 / Hynobiidae / サザンブロットハイブリダイゼーション |
研究概要 |
細胞遺伝学的分析により、対象とした4種の染色体数はBatrachuperus pinchoniiが66、Ranodon shihiが66、Pseudohynobius flavomaculatusが52、Pseudohynobius tsinpaensisが66であった。染色体数のデータは、Batrachuperus pinchonii、Ranodon shihiについては既存のデータ(それぞれ2n=62、64)と異なり、他の2種については初めて検索されたものである。核型分析により、R shihiとP.tsinpaensisのそれが極めて類似していることが判明した.前3者から得られた染色体バンドパターン(得られたバンドパターンについては全く新しい知見である)と日本産のSalamanndorella kyeserlingii(中国東北部にも生息)のそれとを相互に比較検討した結果、相互に相同なバンドパターンをもつ染色体が存在することが判明した。種間で相同なパターンの占める割合が大きいほど、種間が近縁であると考えられる。ギムザ染色の核型分析のデータも含めて総合的に判断すると、これら4種の系統に関する細胞遺伝学的な分析からの結論は、R shihiとP.tsinpaensisが極めて近縁で次にP.flavomaculatusが続き、さらにB.pinchoniiが近く、S.kyeserlingiiが比較した5種の内で最も遠位にあることが判明した。 分子遺伝学的な解析は、まずそれぞれ抽出、精製した4種のDNAを制限酵素DraI、ScrF Iで消化し電気泳動した泳動パターンの比較検討を行った。次に泳動したサンプルに、R shihiとP.flavomaculatusから得たそれぞれ0.59kbと0.39kbの高頻度反復配列のプローブを用いたサザンブロットハイブリダイゼーションのパターンを解析した。結果は、どのパターンもR shihiとP.tsinpaensisの示すパターンがほとんど同じであり、次に近いのがP.flavomaculatus、次にB.pinchoniiが近く、S.kyeserlingiiがそれに続くという細胞遺伝学的分析と全く同じ結果を得た。今後、両分析とも数値に置き換えてその近縁の度合いを示すよう、現在検討を行っている。
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