研究課題/領域番号 |
06454147
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研究機関 | 鹿児島大学 |
研究代表者 |
矢田 俊彦 鹿児島大学, 医学部, 助教授 (60166527)
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研究分担者 |
丸山 征郎 鹿児島大学, 医学部, 教授 (20082282)
加計 正文 鹿児島大学, 医学部, 講師 (90214270)
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キーワード | PACAP / インスリン分泌 / 膵β細胞 / ランゲルハンス島 / Ca^<2+> / オートクリン / 受容体 |
研究概要 |
膵とランゲルハンス島におけるPACAPの局在:ラット膵切片を、抗PACAP抗体を用いて免疫組織化学的に染色し、PACAPの局在を調べた。その結果、膵ランゲルハンス島近傍の神経線維およびランゲルハンス島細胞が陽性染色された。外分泌部の膵には染色は認められなかった。 ランゲルハンス島におけるPACAPのAutocrine/Paracrine作用: (1)β細胞レベルでの検証:ランゲルハンス島を高グルコース液中でインキュベートし、上澄み液を採取した。分離単一β細胞の細胞質Ca^<2+>濃度([Ca^<2+>]_i)測定において、上澄み液の1/100希釈を灌流液に添加すると、[Ca^<2+>]_i増加応答が発生した。上澄み液を予め抗PACAP抗体(PACAP抗血清)と混ぜてから添加すると[Ca^<2+>]_i増加応答は著明に減弱するか消失した。 (2)ランゲルハンス島レベルでの検証:ランゲルハンス島を高グルコース液中でインキュベートし、コントロールおよび抗PACAP抗体(PACAP抗血清)存在下において、インスリン放出量を測定した。PACAP抗血清の存在により、グルコース誘発インスリン放出は約30%抑制された。非免疫血清はインスリン放出に影響しなかった。 ランゲルハンス島のPACAP受容体:PACAP選択的受容体蛋白に対する抗体を用いた免疫組織化学により、ラット膵ランゲルハンス島の全域が陽性染色された。 結論 PACAPはランゲルハンス島細胞で合成され、グルコース刺激下で分泌され、ランゲルハンス島β細胞に作用してグルコース誘発インスリン分泌を増強し、Autocrine/Paracrine作用を発揮することが示唆される。
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