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Fv-1遺伝子による増殖抑制下でBトロピックMLVを培養した場合、理論的にはB→NB、B→Nの2通りのエスケープが可能なはずであるにもかかわらず、B→NBというエスケープしか起こらないとされてきた。本研究ではB→NBのエスケープが点変異によること、さらにB→Nの変化も組み換えにより起こり得ること、を明らかにした。
我々の教室で分離されたエスケープ変異体(NBトロピックMLV)のキャプシド遺伝子部分をPCR法で増幅し、塩基配列を決定した。エスケープ変異体では313番目の塩基がG→Aへと変異していた。この変異はキャプシドの105番目のアミノ酸をアスパラギン酸からアスパラギンへと置換し、しかもその置換は既に同定されているNまたはBの決定基(キャプシド蛋白質p30の109番目と110番目の2アミノ酸)の外に存在していた。
大腸菌由来のsupF遺伝子をLTR内にマーカーとして持つ組み換えBトロピックMLV(BMoF)をFv-1^<b/b>のYH-7細胞にトランスフェクションして得たウイルスを、YH-7細胞で4週間培養した。後者をNIH3T3細胞(Fv-1^<n/n>)に感染させたところ早期にNトロピックMLVが出現した。このNトロピックMLVではトロピズム決定部位6塩基中4塩基がB-MoFと異なっていた。YH-7細胞のゲノム中には内在性ウイルス由来のNトロピック配列を確認した。エスケープ変異体であるNトロピックMLVをNIH3T3細胞に感染させ、複製中間体を抽出しサザンハイブリダイゼーション法を行ったところ、同一分子上にsupF遺伝子とNトロピックの配列の両方を持つころがわかった。すなわち、外来のB-MoFとYH-7細胞内在性ウイルスとの間で、組み換えが起こったと考えられた。
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