消化管粘膜損傷後のアポトーシス及び再生修復機構の細胞・分子生物学的研究

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06454266
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 佐藤 信紘 順天堂大学, 医学部, 教授 (90028358)
• 研究分担者: 前広 康平 順天堂大学, 医学部, 助手 (30238878) ; 山口 泰 順天堂大学, 医学部, 助手 (70241015) ; 北村 庸雄 順天堂大学, 医学部, 助手 (20231285) ; 渡辺 純夫 順天堂大学, 医学部, 助教授 (20138225)
• キーワード: gastric ulcer 男性度 / growth factor 増殖因子 / cytoskeleton 細胞骨性 / migration 細胞遊走 / proliferation 細胞増殖 / wound healing 損傷性対 / culture cell 培養細胞

研究概要

胃粘膜損傷の修復は、上皮及び間葉組織の相互作用、さらに増殖因子により修飾を受ける。著者等は、胃粘膜上皮、間葉系細胞を用いた損傷修復モデルを確立し様々な検討を行ってきた。本年度は、胃粘膜損傷修復と細胞増殖因子の修復能に与える影響を検討した。初代培養胃粘膜上皮細胞及び線維芽細胞は、collagenase消化法で同一の家兎より作製し、完全なcell sheetを形成後面積の一定した損傷を作製した。修復経過はtime-lapse VTRを用いた損傷修復速度、Brdu染色を用いた細胞増殖能を指標に解析した。人工的損傷作成後、EGF、Insulin、bFGF、HGF、TGFを添加培養し影響を検討した。上皮細胞は、48時間、繊維芽細胞は4週間でcell sheetを形成した。上皮細胞損傷(2mm^2)は、早期の細胞遊走に後期の細胞増殖が加味され48時間で修復した。線維芽細胞損傷(1.5mm^2)は、早期より細胞遊走と増殖が起こり5日後に修復した。bFGF、TGF-b群では上皮系細胞の修復速度、増殖能に全く影響を与えなかったが、胃線維芽細胞の修復速度、細胞増殖を有意に促進した。EGF、Insulin、TGF-a、HGF、PDGF群では、上皮系細胞の修復速度、増殖を有意に促進した。生体において胃粘膜防御機構を増強し、損傷修復に促進的に働くとされる増殖因子を上皮細胞、線維芽細胞を用いた修復モデルで検討し、増殖因子によりその標的細胞が異なることを明らかにした。胃粘膜防御機構、修復機構においては、様々なサイトカインが異なる時相、異なる標的細胞に作用することが推定されこのネットワークの恒常性が重要な働きをするものと考えられた。本年度の研究は主に増殖因子と間葉系、上皮系の損傷修復に増殖因子がいかに重要かを明らかにすることができ有効に機能したものと考える。

研究成果

• [文献書誌] Watanabe S, Wang X, Kitamura T, Sato N: "Basic fibroblast growth factor accelerates gastric mucosal restoration in vitro by promoting mesenchymal cell migration and proliferation." J of Gastroenterology and Hepatology. 10. 627-632 (1996)
• [文献書誌] Watanabe S, Hirose M, Maehiro K, Sato N: "A new model to study repair of gastric mucosa using primary cultured rabbit gastric epithelial cells." J Clinical Gastroenterol. 21. 40-44 (1995)
• [文献書誌] Ikejima K, Watanabe S, Miyazaki A, Sato N: "Hepatocyte growth factor inhibits intercellular communication via gap junction in rat hepatocytes." Biochemical and Biophysical Research communication. 214. 441-446 (1995)
• [文献書誌] Endo K, Watanabe S, Nagahara A, Sato N: "Restoration of gap junctions in the regenerative process of ethanol induced gastric mucosal injury." J of Gastroeterology and Hepatology. 10. 589-594 (1995)
• [文献書誌] Watanabe S, Hirose M, Miyazaki A, Sato N: "Role of actin and calmodulin in migration and proliferation of rabbit gastric mucosal cells in culture." J of Gastroenterology and Hepatology. 9. 325-333 (1994)
• [文献書誌] Sato N, Watanabe S, Hirose M, Ogihara T,: "Effect of nicotine in migration and proliferation of rabbit gastric mucosal cells in a culture cell model." J of Gastroenterology and Hepatology. 9. 66-71 (1994)