血管再狭窄の成因に関する臨床的ならびに基礎的検討

1995 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 06454287
• 研究種目: 一般研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 循環器内科学
• 研究機関: 群馬大学 (1995); 東京大学 (1994)
• 研究代表者: 永井 良三 群馬大学, 医学部, 教授 (60207975)
• 研究分担者: 中村 哲也 群馬大学, 医学部, 助手 (10272238) ; 新井 昌史 群馬大学, 医学部, 助手 (60270857)
• 研究期間 (年度): 1994 – 1995
• キーワード: 再狭窄 / 動脈硬化 / 平滑筋 / ミオシン / SMemb / SM1 / 2 / 遺伝子 / 転写因子

研究概要

動脈硬化病変では、中膜平滑筋が内膜へ遊走・増殖し、血管内腔の狭窄をきたす。健常な動脈の中膜に存在する平滑筋細胞は細胞周期の静止期にあって筋フィラメントに富むが(収縮型平滑筋)、遊走増殖を始めると粗面小胞体やゴルジ体が豊富で、細胞外マトリックスの分泌が盛んとなり、筋フィラメントを失う(合成型平滑筋)。血管平滑筋の合成型形質への変換において、平滑筋特異的なミオシン重鎖(SM1とSM2)の発現が抑制され、胎児期平滑筋で発現する細胞骨格(非筋細胞型ミオシン重鎖SMemb)の発現が亢進する。
本研究ではSMemb遺伝子とSM1/2遺伝子の両者を単離し、それぞれの活性化に必要なエレメントとSMemb遺伝子に結合する転写因子のクローニングを行った。SMemb遺伝子は転写開始の上流-100bp付近に重要なエレメントが存在し、サウスウエスタン法によってZn fingerドメインをもつBTEB2と、ホメオ蛋白であるHexの2種類が単離された。そのうちBTEB2についてはSMemb遺伝子の転写活性を亢進させる作用が確認された。なお、平滑筋細胞におけるSMemb発現は、冠動脈硬化巣の拡張術後に生ずる再狭窄病変において認められ、ミオシン重鎖遺伝子発現のスイッチングが臨床的にも平滑筋形質変換の分子マーカーになることが示された。
SM1/2遺伝子については-90bp付近のCCTCCCエレメントが転写の活性化に重要であることが明らかになったが、平滑筋特異性については更に検討が必要であった。

研究成果

• [文献書誌] Kurihara Y et al: "Aortic Arch malformation and ventricular septal defect in mice deficient in endothelin-1." J Clin Invest. 96. 293-300 (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Takewaki S et al: "Activation of Na^+-H^+ antiporter (NHE-1) gone, expression during growth, hypertrophy and proliferation of the rabbit cardio-vascular system" J. mol. Cell. Cardiol. 27. 729-742 (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Okamoto E. et: "Diversity of the synthetic-state smooth muscle cells proliferating in mechanically and hemodynamically injured arteries" Lab. Invest. 74. 120-128 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Watanabe M et al.: "Structure and characterization of the 5' flanking region of the mouse smooth muscle myosin heavy chain gene" Circ Res. (印刷中).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Suzuki T et al: "A novel biochsmical diagnostic method for aortic dissection" Circulation. (印刷中).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Suzuki T, Nagai R, et al: "Preferential differentiation of P19 mouse embryonal carcinoma cells into smooth muscle cells; use of retinoic acid and antisense against the central nervoussystem-specific POU transcription factor Brn-2." Circulation Res. 78. 395-404 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Watanabe M, Nagai R et al.: "Tandem elements of CCTCCC are required for the cell-type-specific expression of the mouse smooth muscle myosin heavy chain gene (SM1/2) promoter." Circulatin Res. (印刷中).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Takewaki S,Kuro-o M,Hiroi Y,Watanabe M,Noguchi T,Nakahara K,Aikawa M,Manabe I,Ohkubo A,Yazaki Y,Nagai R.: "Activation of Na^+-H^+antipoter(NHE-1)gene expression during growth, hypertrophy and proliferation of the rabbit cardiovascular system" J.Mol.Cell Cardiol.27. 729-742 (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kimura K,Nagai R,Sakai T,Aikawa M,Kuro-o M,Kobayashi N,Shirato I,Inagami T,Oshi M,Suzuki N,Oba S,Mise N,Tojo A,Hirata Y,Goto A,Yazaki Y,Omata M.: "Diversity and variability of smooth muscle phenotypes of renal arterioles as revealed by myosin isoform expression." Kidney Int. 48. 372-382 (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Kurihara Y,Kurihara H,Oda H,Maemura K,Nagai R,Ishikawa T,Yazaki Y.: "Aortic arch malformations and ventricular septal defect in mice deficient in endothelin-1." J Clin Invest. 96. 293-300 (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Shimada H,Shimizu T,Kuwayama H,Suzuki M,Nagai R,Morii H: "Immunocytochemical localization of 155 kDa myosin light chain kinase and myosin heavy chain in bovine brain." Brain Res. 682. 212-214 (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Okamoto E,Suzuki T,Aikawa M,Jun Fujii, Kuro-o M,Nakahara K,Yazaki Y,Nagai R.: "Diversity of the synthetic-state smooth muscle cells proliferating in mechanically and hemodynamically injured rabbit arteries." Lab Invest.(in press.).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Hiroi J,Kimura K,Sakai T,Aikawa M,Kuro-o M,Kobayashi N,Shirato I,Inagami T,Oshi M,Suzuki N,Oba S,Mise N,Tojo A,Hirata Y,Goto A,Yazaki Y,Omata M,Nagai R.: "Expression of a nonmuscle myosin heavy chain in glomerular cells differentiates various types of glomerular disease in rats." Kidney Int. (in press.).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Watanabe M,Sakomura Y,Aikawa M,Sakomura Y,Kuro-o M,Suzuki T,Yazaki Y,Nagai R.: "Structure and characterization of the 5'-flanking region of the mouse smooth muscle myosin heavy chain (SM1/2) gene." Circulation Res. (in press.).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Suzuki T,H-S Kim, Kurabayashi M,Hamada H,Fujii H,Aikawa M,Watanabe M,Yazaki Y,Nagai R.: "Preferential differetiation of P19 mouse embryonal carcinoma cells into smooth muscle cells ; using retinoic acid and antisense against the CNS-specific POU transcrioption factor Brn-2." Circulation Res. (in press.).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Suzuki J,Isobe M,Aikawa M,Kawauchi M,Shiojima I,Kobayashi N,Tojo A,KimuraK,Nishikawa T,Sakai T,Sekiguchi M,Yazaki Y,agai R.: "Nonmuscle and smooth muscle myosin heavy chain expression in rejected cardiac allograft-a study in rat and monkey models." Circulation.(in press.).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Suzuki T,Katoh H,Suzuki S,Ohtaki E,Watanabe M,Yazaki Y,Nagai R.: "A novel biochemical diagnostic method for aortic dissection-the results of a prospective study using an immunoassay of smooth muscle myosin heavy chain." Circulation. (in press.).
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より