| 研究概要 |
本年度はMagnetic cell separator(MACS)でCD14陽性マクロファージ/モノサイトの分離を行い,その形態像を電子顕微鏡で検討した。
磁気を帯びたマイクロビーズのついたCD14モノクローナル抗体を末梢血免疫担当細胞と反応させた後、強力な磁場の中においたカラムを通しCD14陽性単球/マクロファージを分離した。対象は川崎病の患児5例(年齢3ヶ月〜3歳5ヶ月,平均年齢1歳8ヶ月,平均病日5日),細菌性股関節炎(年齢10ヶ月),伝染性単核症(年齢1歳)を疾患コントロールした。分離したCD14陽性単球/マクロファージをグルタール固定,オスミウム後固定,エポン包埋などの処理をほどこし電子顕微鏡で観察した。
MACSによって分離した陽性細胞をエポン包埋したものをトルイジンブルー染色してみると単球/マクロファージの形態を持った細胞が採取された。川崎病の患児のCD14陽性単球/マクロファージは,疾患コントロールに比べて核の構造が複雑に分葉し,核小体が明瞭なものが多く認められ,核小体が2つ認められるものもあった。また細胞質内においては,疾患コントロールに比べ非常に多くの顆粒が認められた。densityの高いものや低いものなど様々な顆粒を認めたが,特異的な封入体は認められなかった。これらの所見は重症例ほど強く,特に冠動脈病変合併例で強く認められた。このような形態的変化はTNFαなどのサイトカインの分泌との関連が予想され,現在TNF receptor遺伝子mRNAの定量を試みている。
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