TATAボックス結合因子TFIIDを中心とした真核細胞転写開始および調節機構の解析

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06454650
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 堀越 正美 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助教授 (70242089)
• キーワード: TATAボックス結合因子 / TEIID / TBP / 転写調節 / 転写活性化 / クロマチン転写 / 転写調節因子 / 相互作用

研究概要

1.TFIIDサブユニット4種の単離とTFIIDサブユニット間の相互作用の解析
更に、ショウジョウバエ細胞より低分子量サブユニット4種のものについてcDNA単離をした。これらのうち3種のものについては、ヒストンH3、H4に相同性領域を持つものであり、クロマチン転写との関連性が示唆された。これらのものについては、ヒト細胞からもすでにcDNA単離を済ませており、この相同性はヒト細胞でも見られている。(未発表)。今までに得られているショウジョウバエ細胞からのTFIIDサブユニット間の分子間相互作用の研究を行い、サブユニット間の相互作用の関係を明らかにしてきた。これらは、調節因子郡の持つ性質をどのように受け入れて転写活性化が行われているという基礎情報になる。
2.TBPサブユニットの変異を利用しての転写調節因子による転写活性化に関与する領域決定と作用機構の解析
転写調節因子の代表的因子のひとつであるVP16をモデル系に用いて、転写活性化に関与するTBPの分子表面を決定した。様々な変異TBPを用いて解析した結果、3つの変異TBPが基本転写には影響を与えないが、VP16による転写活性化に影響を与えることを示した。これらの位置は、TBPの三次構造内において空間的に異なるため、ひとつの転写因子がそれら3つの位置に配置されて相互作用するとは考えにくく、3つ以上の因子が転写活性化に関わる、すなわち3つ以上の転写因子-TBP相互作用が転写活性化に必要であることが示された。

研究成果

• [文献書誌] T.Kokubo,et al.: "Molecular cloning of Drosophila TFIID subunits" Nature. 367. 484-487 (1994)
• [文献書誌] T.Kokubo,et al.: "Interaction between the N-terminal domain of the 230-kDa subunit and the TATA box-binding subunit of TFIID negatively regulates TATA-box binding" Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.91. 3520-3524 (1994)
• [文献書誌] T.K.Kim,et al.: "Effects of activation-defective TBP mutations on transcription initiation in veast" Nature. 369. 252-255 (1994)
• [文献書誌] G.Mizuguchi,et al.: "Independent control of transcription initiations from two sites by an initiator-like element and TATA box in the human c-erbB-2 promoter" FEBS Lett.348. 80-88 (1994)
• [文献書誌] F.Saito,et al.: "Direct mapping of the human TATA box-binding protein(TBP)gene to 6q27 by fluorescence in situ hybridization" Jpn.J.Human Genet.39. 421-425 (1994)