1994 年度実績報告書

スライスパッチ法を用いた網膜アマクリン細胞の研究

研究課題

研究課題/領域番号	06454715
研究機関	慶応義塾大学
研究代表者	金子章道慶應義塾大学, 医学部, 教授 (00051491)
研究分担者	三輪尚史慶應義塾大学, 医学部, 助手 (40255427) 渡辺修一慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (60138120)
キーワード	アマクリン細胞 / ナトリウム電流 / カリウム電流 / カルシウム電流 / 網膜 / スライス標本
研究概要	網膜アマクリン細胞は内網状層に存在する介在ニューロンで、神経節細胞の応答形成に重要な役割を果たしていると考えられている。大多数は抑制性ニューロンであるが、興奮性ニューロンや少数のアミン含有性ニューロンも存在する。アマクリン細胞については技術的な理由から、膜の性質や、シナプス入出力に関する詳細な研究が進んでおらず、視神経の光応答や受容野の形成にアマクリン細胞がどのように寄与しているのかが明らかになっていない。本研究では、網膜のスライス標本を用い、アマクリン細胞を直視下で同定しつつ電位依存性膜電流や伝達物質に対する応答を解析し、アマクリン細胞の特性と、網膜における役割を明らかにすることを目的とした。アマクリン細胞は網膜内顆粒層の最内側に存在する。キンギョから摘出した網膜をミリポア濾紙の上に張り付け、濾紙ごと剃刀の歯で150〜200μmの厚さにスライスした。スライスを灌流液中で水浸レンズを用いて観察し直視下で0.5%のルシファイェロ-を詰めたパッチ電極でスライス標本中のアマクリン細胞を記録した。ルシファイェロ-によって染色された形態から、記録したアマクリン細胞をON型、OFF型、ON-OFF型に分類することが出来た。これらのアマクリン細胞が持つ電圧依存性膜電流をwhole cellクランプ法で解析したところ、ほとんど全ての細胞に2種類のカリウム電流(I_AI_<K(V)>)、カルシウム電流が記録された。ナトリウム電流はON型、OFF型では大部分の細胞に見られたが、ON-OFF型細胞ではその一部にしか観察できなかった。

研究成果

(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Kaneko,A.,de la Villa,P.,Kurahashi,T.& Sasaki,T.: "Role of L-glutamate for formation of ON-and OFF-responses in the retina." Biomed.Res.15(Suppl.1). 41-45 (1994)
[文献書誌] Takahashi,K.,Miyoshi,S.& Kaneko,A.: "Two components of GABA-induced currents in catfish retinal horizontal cells." Jpn.J.Physiol.44(Suppl.2). S141-144 (1994)
[文献書誌] de la Villa,P.,Kurahashi,T.& Kaneko,A.: "L-Glutamate-induced responses and cGMP-activated channels in three subtypes of retina bipolar cells dissociated from the cat." J.Neurosci.印刷中
[文献書誌] Shen,J.,Watanabe,S.& Kaneko,A.: "Cell dissociation with papain reduces the density of cGMP-activated channels of the retinal rod." Jpn.J.Physiol.45. 印刷中
[文献書誌] 倉橋隆、金子章道: "光フラッシュによる嗅細胞情報変換システムの活性化と解析" 日本味と匂学会誌. 1. S241-S244 (1994)
[文献書誌] 伊藤嘉邦、倉橋隆、金子章道: "匂い刺激用圧力制御装置の開発" 日本味と匂学会誌. 1. S245-S248 (1994)
[文献書誌] 松田十四、羽柴基之、馬場駿吉、倉橋隆、金子章道: "イモリ単離嗅細胞における嗅覚感度の測定" 日本味と匂学会誌. 1. S249-S252 (1994)

1994 年度 実績報告書

スライスパッチ法を用いた網膜アマクリン細胞の研究

研究代表者

金子 章道 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (00051491)

研究成果

[文献書誌] Kaneko,A.,de la Villa,P.,Kurahashi,T.& Sasaki,T.: "Role of L-glutamate for formation of ON-and OFF-responses in the retina." Biomed.Res.15(Suppl.1). 41-45 (1994)

[文献書誌] Takahashi,K.,Miyoshi,S.& Kaneko,A.: "Two components of GABA-induced currents in catfish retinal horizontal cells." Jpn.J.Physiol.44(Suppl.2). S141-144 (1994)

[文献書誌] de la Villa,P.,Kurahashi,T.& Kaneko,A.: "L-Glutamate-induced responses and cGMP-activated channels in three subtypes of retina bipolar cells dissociated from the cat." J.Neurosci.印刷中

[文献書誌] Shen,J.,Watanabe,S.& Kaneko,A.: "Cell dissociation with papain reduces the density of cGMP-activated channels of the retinal rod." Jpn.J.Physiol.45. 印刷中

[文献書誌] 倉橋 隆、金子 章道: "光フラッシュによる嗅細胞情報変換システムの活性化と解析" 日本味と匂学会誌. 1. S241-S244 (1994)

[文献書誌] 伊藤 嘉邦、倉橋 隆、金子 章道: "匂い刺激用圧力制御装置の開発" 日本味と匂学会誌. 1. S245-S248 (1994)

[文献書誌] 松田 十四、羽柴 基之、馬場 駿吉、倉橋 隆、金子 章道: "イモリ単離嗅細胞における嗅覚感度の測定" 日本味と匂学会誌. 1. S249-S252 (1994)

1994 年度実績報告書

金子章道慶應義塾大学, 医学部, 教授 (00051491)

[文献書誌] 倉橋隆、金子章道: "光フラッシュによる嗅細胞情報変換システムの活性化と解析" 日本味と匂学会誌. 1. S241-S244 (1994)

[文献書誌] 伊藤嘉邦、倉橋隆、金子章道: "匂い刺激用圧力制御装置の開発" 日本味と匂学会誌. 1. S245-S248 (1994)

[文献書誌] 松田十四、羽柴基之、馬場駿吉、倉橋隆、金子章道: "イモリ単離嗅細胞における嗅覚感度の測定" 日本味と匂学会誌. 1. S249-S252 (1994)