| 研究課題/領域番号 |
06556052
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
小沼 操 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (70109510)
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| 研究分担者 |
屋代 真彦 バイエルジャパン(株), 研究開発員
大石 和恵 東燃(株), 総合研究所, チームリーダー
田中 雅之 (株)微生物化学研究所, 研究員
渡来 仁 岡山大学, 医学部, 講師 (50175139)
杉本 千尋 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助教授 (90231373)
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| キーワード | 原虫 / 表面抗原 / リポソーム / 組換えワクチン / 合成ペプチドワクチン / 細胞性免疫 |
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| 研究概要 |
タイレリア原虫表面抗原(p32)をワクチン候補と考え、組換えバキュロウイルスを用い原虫p32を大量発現させた。p32のアミノ酸コード領域には原虫が赤血球侵入時に重要なリシン-グルタミン酸-リシン(KEK)配列が存在する。昨年、日本に分布するタイレリア原虫にはp32遺伝子型より主に池田(I)型と千歳(C)型の2種であることを明らかにした。そこでワクチン候補としてC型由来組換えp32、C型とI型由来のKEK配列を含む近傍の合成ペプチドの3種を用いた。ペプチドは8量体としてそれぞれの抗原はフロイントの完全アジュバントとマンナン-リポソームをアジュバントとして用い免疫した。子牛に4回免疫後C型とI型混合のスポロゾイトで攻撃し寄生率、ヘマトクリット値ならびに出現原虫のp32遺伝子型別を行った。その結果免疫牛では免疫に用いた原虫の遺伝子型に一致して原虫の増殖抑制が認められた。すなわちC型ならびにI型由来合成ペプチドで免疫するとそれぞれの型の原虫増殖が抑制された。リポソームをアジュバントとして用いることによりフロイントのアジュバントよりも抗原量が少量で効果が認められた。
マンナン-リポソームで封入した合成ペプチド抗原をマウスに免疫するとCD4のTh1タイプの細胞が活性化された。この事は合成ペプチドでもリポソームを用いることにより細胞性免疫が誘導されることを示している。
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