1996 年度実績報告書

精子と卵子透明帯の結合機構の解明と新しい避妊ワクチン開発への応用

研究課題

研究課題/領域番号	06556057
研究機関	東京大学
研究代表者	森庸厚東京大学, 医科学研究所, 助教授 (40012760)
研究分担者	須藤忠四キリンビール医薬探索研究所, 副所長馬場忠筑波大学, 応生系, 助教授 (40165056) 高崎誠一東京大学, 医科学研究所, 助教授 (80112093)
キーワード	sp38 / 精子 / 透明帯 / 避妊ワクチン
研究概要	哺乳類の受精の機序を解明すること、またこれにより得られた知見を生体内での受精調節に応用することを目的として以下の研究をおこなった。受精の際、精子はまず卵子外層の透明帯を認識して結合する。そこで多量に材料を得ることの可能なブタの系を用いて、透明帯糖蛋白質と結合する精子蛋白質を酵素抗体法にて検索した。精子を可溶化し数種のカラム操作をおこなった後、アスパラギン結合型糖鎖を持つ分子量38000の新規な糖蛋白質を得てsp38と命名した。この分子のアミノ酸部分配列のを基にブタ精巣cDNAライブラリーを用いてクローニングを行った結果、350アミノ酸残基に相当するsp38cDNAを得た。このsp38cDNAをプローブとしてマウス、ヒトの精巣cDNAライブラリーよりマウス型、ヒト型のsp38cDNAをクローニングした。これらは互いに70^〜80%の高いアミノ酸の保存性を示していた。ノーザンブロット解析の結果、sp38は精巣特異的に発現していることが示された。またブタsp38は3種の透明帯糖蛋白質分子、pZPA、pZPB、pZPCのうちpZPAに特異的にカルシウム存在下で結合することも明らかになった。抗体を作製して調べた結果、sp38は精子先体部に局在し、先体反応が完了した後は放出され消失することが示された。ウサギで作製したブタsp38全分子に対する抗体、およびアミノ酸部分配列に対する抗体は、in vitroの系でブタ卵子と精子の結合を阻害した。また雌マウスにマウス型sp38を免疫すると強い抗体価の上昇が認められ、この抗体はマウス卵子と精子間の結合を阻害した。これら結果は生体内で受精が成立する卵管内にIgA抗体を効率良く分泌させることによりin vivoでの受精阻害が可能であることを示唆するものである。

研究成果
(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] XuJP,Mori T,et al: "Expression of Fxs ligand mRNA in murine ovary" JSIR. 10. 63-64 (1996)
[文献書誌] GuoMW,Mori T,et al: "Expression of Fas-Fas ligand system in murine ovary and its role for atresia through apoptosis" J.Reprod.Dev.(in press). (1997)
[文献書誌] Mori E,Mori T,et al: "Zona pollucida-bindingprotein,Sp38,from boarsperm" J.Reprod.Dev.(in press). (1997)
[文献書誌] Mori T,et al.: "Expression of Fas-Fas ligand system associated with atresia through apoptosis in mutine ovary" Hormone Res.(in press). (1997)
[文献書誌] GouMW,Mori T et al: "Expression of Fas ligand in murine ovary" Am.J.Reprod.Immunol.(in press). (1997)
[文献書誌] Mori T et al: "Moleucular mechanisms in mammalian ferilazation" J.Mamm.Ova.Res.(in press). (1997)
[文献書誌] 森庸厚他: "生殖生理と免疫〜生殖現象における免疫系の役割" MEDICAL VIEV, 141 (1996)
[文献書誌] 森庸厚他: "マウス胚の操作マニュアル(改訂II)" 近代出版(in press), (1997)

1996 年度 実績報告書

精子と卵子透明帯の結合機構の解明と新しい避妊ワクチン開発への応用

研究代表者

森 庸厚 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (40012760)

研究成果

[文献書誌] XuJP,Mori T,et al: "Expression of Fxs ligand mRNA in murine ovary" JSIR. 10. 63-64 (1996)

[文献書誌] GuoMW,Mori T,et al: "Expression of Fas-Fas ligand system in murine ovary and its role for atresia through apoptosis" J.Reprod.Dev.(in press). (1997)

[文献書誌] Mori E,Mori T,et al: "Zona pollucida-bindingprotein,Sp38,from boarsperm" J.Reprod.Dev.(in press). (1997)

[文献書誌] Mori T,et al.: "Expression of Fas-Fas ligand system associated with atresia through apoptosis in mutine ovary" Hormone Res.(in press). (1997)

[文献書誌] GouMW,Mori T et al: "Expression of Fas ligand in murine ovary" Am.J.Reprod.Immunol.(in press). (1997)

[文献書誌] Mori T et al: "Moleucular mechanisms in mammalian ferilazation" J.Mamm.Ova.Res.(in press). (1997)

[文献書誌] 森 庸厚他: "生殖生理と免疫〜生殖現象における免疫系の役割" MEDICAL VIEV, 141 (1996)

[文献書誌] 森 庸厚他: "マウス胚の操作マニュアル(改訂II)" 近代出版(in press), (1997)

1996 年度実績報告書

森庸厚東京大学, 医科学研究所, 助教授 (40012760)

[文献書誌] 森庸厚他: "生殖生理と免疫〜生殖現象における免疫系の役割" MEDICAL VIEV, 141 (1996)

[文献書誌] 森庸厚他: "マウス胚の操作マニュアル(改訂II)" 近代出版(in press), (1997)