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1996 年度 研究成果報告書概要

下痢原因細菌の多種類の病原因子の同時迅速鑑別検出法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 06557019
研究種目

基盤研究(A)

配分区分補助金
応募区分試験
研究分野 細菌学(含真菌学)
研究機関大阪大学

研究代表者

本田 武司  大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (60029808)

研究分担者 飯田 哲也  大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (90221746)
余 明順  大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (70093482)
山本 耕一郎  大阪大学, 微生物病研究所, 助教授 (30158274)
研究期間 (年度) 1994 – 1996
キーワード抗体 / 化学固定 / 下痢原因細菌 / 迅速診断 / 腸炎ビブリオ / コレラ菌
研究概要

本研究では、問題の多い下痢原因細菌の病原因子を指標にして、(1)同時、(2)迅速、(3)鑑別検出法の開発をめざし、次のような成果を挙げた。
1.抗体をナイロン膜表面など重合体表面に化学結合させる新しい化学反応システムを開発した。この反応はpolythelene imineでアミノ基を、さらにmaleic anhydride methylvinyl ether copolymerでカルボキシル基を導入することで、多数の抗体分子をポリマー表面に温和に化学結合させる全く新しい抗体の化学結合法である。
2.上記の抗体固定法を用いて、代表的な下痢原因菌(コレラ菌、毒素原性大腸菌、腸炎ビブリオ)を用いて、簡易、迅速、鑑別検出を可能にする系を実際に開発した。
3.さらに、上記(1)を改良した。つまりポリマー表面にフェノール基を導入し、抗体のうちの疎水性の強いFc部分をポリマー表面に向かわせ(1)と同様に化学結合させることでFab部分を抗原との反応により与りやすくさせる方法を確立した。これにより検出感度を大きく上げることができた。
これらの手法は、多くの病原菌の検出に応用できると思われ、広く検出・診断法に応用されてゆく可能性が期待される。

  • 研究成果

    (12件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (12件)

  • [文献書誌] Koike, N. et al.: "Rapid and differential detection of two analogous enterotoxins of Vibrio cholerae and enterotoxigenic Escherichia coli by a modified." FEMS Immun. Med. Microbiol.(in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Iida, T. et al.: "Evidence for genetic linkage between the ure and trh genes in Vibrio parahaemolyticus." J. Med. Microbiol.(in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Sang, W. K. et al.: "Prevalence of diarrhoeagenic Escherichia coli Kenyan choldren." J. Diarrhoeal Dis. Res.(in press).

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Nagamune, K. et al.: "Intramolecular chaperone activity of the pro-region of Vibrio cholerae E1 Tor cytolyisn." J. Biological Chem.272(2). 1338-1343 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Yoh, M. et al.: "Phosphorylation of a 25kDa protein is induced by thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticus." Int. J. Biochem. Cell Biol.28. 1365-1369 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Nagayama, K. et al.: "Use of alkaline phosphatase-conjugated oligounucleotide probe for the gene encoding the bungle-forming pilus of enteropathogenic." J. Clin. Microbiol.34(11). 2819-2821 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] 本田 武司: "Clinical Infection & Chemotherapy" 大腸菌O-157感染症(基礎から見た腸管出血性大腸菌とその感染症), 2(4):38-41 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] 鳥岡 要他: "医学のあゆみ" 細菌性腸管感染症と粘膜バリア, 122-129 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] T.Honda, T.Miwatani, Y.Yabushita, N.Koike & K.Okada: "A Novel method to chemically immobilize antibody on nylon and its application to the rapid and differential detection of two Vibrio parahaemolyticus toxins in a modified enzyme-linked immunosorbent assay." Clin.Diagn.Lab.Immunol.2. 177-181 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] K.Nagayama, K.Yamamoto, T.Miwatani & T.Honda: "Characterization of a haemolysin related to Vp-TDH produced by a kanagawa phenomenon-negative clinical isolated of Vibrio parahaemolyticus." J.Med.Microbiol.42. 83-90 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] M.Yoh, N,Kawakami, Y.Funakoshi, K.Okada & T.Honda: "Evaluation of two assay kits for thermostable direct hemolysin (TDH) as an indicator of TDH-related hemolysin (TRH) produced by Vibrio parahaemolyticus." Microbiol.Immunol.39(2). 157-159 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] N.Koike, K.Okada, Y.Yabushita, D.Y.Zhang, K.Yamamoto, T.Miwatani & T.Honda: "Rapid and differentical detection of two analogous enterotoxins of Vibrio cholerae and enterotoxigenic Escherichia coli by a modeified enzyme-linked immunosorbent assay." FEMS Immun.Mediacal Miceobiol.17. 21-25 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より

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公開日: 1999-03-09  

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