1996 年度実績報告書

大腸菌oriCプラスミド複製系を用いたDNA合成阻害薬の検索に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号	06557130
研究機関	九州大学
研究代表者	関水和久九州大学, 薬学部, 教授 (90126095)
研究分担者	小早川敬博吉富製薬株式会社, 医薬研究本部, 本部長佐々木茂貴九州大学, 薬学部, 助教授 (10170672) 三木健良九州大学, 薬学部, 助教授 (40037586)
キーワード	大腸菌 / DNA複製 / DnaA蛋白 / ATP結合 / インジゴ / 抗菌剤 / 医薬品開発 / oriCプラスミド
研究概要	本研究は、複製開始蛋白DnaAのATP結合活性に対する阻害を指標として大腸菌のDNA複製阻害剤を検索することを意図したものである。これまでの研究代表者らの予備的な研究により、インジゴの誘導体がDnaA蛋白のATP結合活性を阻害することが分かっていた。本研究では、インジゴから出発して種々の誘導体を合成し、それらの構造とDnaA蛋白へのATP結合の阻害活性との対応を検討した。その結果、アルキル側鎖の重要性など、DnaA蛋白のATP結合活性の阻害に有効な残基を見いだすことに成功し、最終的には、7マイクロモルという低い濃度で50%阻害を示す化合物を見いだすことができた。さらに、この化合物が、試験管内oriCプラスミド複製系において、開始反応を特異的に阻害することを見いだした。我々はこの結果を、1996年の、J.Biol.Chem.に報告した。

[文献書誌] Tohru Mizushima,S.Sasaki,… & Kazuhisa Sekimizu: "Molecular Design of Inhibitors of in Vitro oriC DNA Replication Based on the Potential to Block the ATPB Binding of DnaA Protein" The Journal of Biological Chemistry. 271. 25178-25183 (1996)
[文献書誌] Tohru Mizushima,Y.Ishikawa,… & Kazuhisa Sekimizu: "Influence of Cluster Formation of Acidic Phospholipids on Decrease in the Affinity for ATP of DnaA Protein" The Journal of Biological Chemistry. 271. 3633-3638 (1996)
[文献書誌] Tohru Mizushima,Tsutomu Katayama & Kazuhisa Sekimizu: "Effect on DNA Topology by DnaA Protein,the Initiation Factor of Chromosomal DNA Replocation in Escherichia coli" Biochemistry. 35. 11512-11516 (1996)
[文献書誌] Tohru Mizushima,T.Shinpuku … & Kazuhisa Sekimizu: "Phenotypes of dnaA mutants of Escherichia coli sensitive to phenothiazine derivatives" Mol Gen Genet. 252. 212-215 (1996)
[文献書誌] Tsutomu Katayama,M.Takata & Kazuhisa Sekimizu: "The Nucleoid Protein H-NS Facilitates Chromosomo DNA Replication in Escherichia coli dnaA Mutants" Journal of Bacteriology. 178. 5790-5792 (1996)
[文献書誌] Tohru Mizushima,J.Tanino,T.Miki & Kazuhisa Sekimizu: "Dectease in the Linking Number of Plasmid DNA in dnaA Mutants of Escherichia coli" Biochemical and Biophysical Research Communications. 218. 137-141 (1996)