| 研究概要 |
植物におけるIAAの生合成については、その合成経路すら未確定な段階にある。申請者は、トウモロコシ幼葉鞘先端部でIAAがトリプトファンから合成されている可能性を示してきたが、本研究課題では、このIAAの合成に関与している可能性の高い、インドールアセトアルデヒド(IAALd)酸化酵素に注目し、本酵素の精製とcDNAのクローニングにとり組んだ。
その結果 (1)本酵素を電気泳動的にほぼ単一になるまで精製し、その標品よりマウスから特異性の高い抗体を得ることができた。この抗血清を用いた、Westeru blottingにより、本酵素が幼葉鞘の先端部に多く存在することが明らかになった。
(2)本酵素の基質特異性をさまざまなアルデヒドやIAAに関連する物質について検体し、IAALdおよびインドールアルデヒドに対して親和性の高いものであることがわかった。こうしたことからも、本酵素が植物生体的においてIAAの合成に働いている可能性が強く示されている。
(3)精製標品をSDS電気泳動後、得られるメジャーなペプチドについてアミノ酸配列の一部を決定した。この情報に基づきPCR法によってcDNA断片を得た。この断片をもとにおよそ4Kb長(ほぼ全長)のcDNA2種が得られている。現在、全配列の正確な決定をすすめているが、木モロジー検索ではウシのアルデヒド酸化酵素,動物のキサンチンデヒドロゲナーゼとの高い相同性が示されている。この配列は、植物では世界ではじめてのものである。
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