| 研究概要 |
ダイコン細胞壁から抽出精製したホウ素多糖複合体(BPC)でウサギを免疫しウサギ抗血清を調製した。抗体はメチル化BSAをキャリアとして用いたときのみ生成された。抗体価の測定のためにナイロンメンブレンを用いる,酸性多糖に適合したイムノブロット法を開発した。市販二次抗体は使用に耐えず独自に再精製が必要であった。得られた抗体はBPCに特異的で1ngのBPCまで検出することが出来た。細胞壁から調製した様々な多糖断片に対する特異性を検討したところ本抗体はBPCとだけ反応することが確認されたので本抗体を用いて免疫電顕を行った。ダイコン幼植物根を定法によりLRホワイト樹脂に固定包埋した。厚めの切片で光学顕微鏡観察を,超薄切片で電子顕微鏡観察を行った。光顕切片は金コロイド-銀増感法で抗体の結合部位を検出した。BPCのシグナルは切片全体に検出されたが特に表皮と内皮に高かった。この結果はBPCがこれらの組織にやや多く存在していることを示唆する。電顕観察ではシグナルは細胞壁全体に検出されたが特に細胞の四隅に強く見られた。光顕の結果と併せて考えると,ホウ素多糖複合体は細胞壁の中でも特に強度を求められるような部位に多く集積しているように思われた。
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