遺伝子増幅ハイブリッド組織化学によるレニン産生細胞の検出

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06660367
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 昆 泰寛 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助教授 (10178402)
• 研究分担者: 遠藤 大二 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助手 (40168828)
• キーワード: 外分泌 / 凝固腺 / ハイブリッド組織化学 / マウス / 免疫電顕 / Reverse transcriptase / レニン / Polymerase chain reaction

研究概要

本研究はレニン産生細胞とターゲットとしてより高感度なハイブリッド組織化学法を開発するとともに、局所レニンの産生臓器としてマウス雄凝固腺に存在するレニンの機能を解明することにある。本年度は、代表的なレニン産生臓器である腎臓の他に、微量なレニン産生をおこなう臓器としてリンパ節をRT-PCR法によって特定した。これらの臓器を用いて本法を行い有効なプローブ濃度、proteinase Kの反応条件、ハイブリダイゼーション温度の設定を検討した。その結果、腎臓では十分な反応を得ることはできなかったが、、リンパ節で有効なシグナルを検出し得た。またハイブリダイゼーション温度は63℃で最適な結果が得られた。本法によってリンパ節の毛細血管後細静脈に強いドット状のシグナルの局在が認められた。次に、従来より検討してきた凝固腺レニンの検出をIn situハイブリダイゼーション法とIn vitroのRT-PCRを併用して、去勢とテストステロン投与による変化を観察した。両方法では去勢後4週の凝固腺でレニンのシグナルは検出されなかった。RT-PCR法の組織応用は最適な臓器の選択が重要であることが示唆され、今後各種の臓器に特異的な条件を明らかにしていく必要性がある。

研究成果

• [文献書誌] Kon,Y: "Expression of renin in coagulating glands is regulated by testosterone." The Anatomical Record. 241. 451-460 (1995)
• [文献書誌] 昆 泰寛: "血圧調節に関与するレニン-アンギオテンシン系の局所発現" 北海道獣医師会雑誌. 39. 1-4 (1995)
• [文献書誌] 昆 泰寛: "副腎レニンはライソゾーム顆粒に存在する" 生体の科学. 46. 291-293 (1995)
• [文献書誌] Kon,Y: "Morphological evidence of exocrine function in coagulating gland renin of mouse strain C57BL/6." The Anatomical Record. 243. 200-207 (1995)
• [文献書誌] Kon,Y: "Detection of coagulating gland renin by hybridohistochemistry." Anatomia Histologia Embryologia. (in press). (1996)
• [文献書誌] Kon,Y: "Expression of renin in coagulating glands." Histology and Histopathology. 11(in press). (1996)