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血管沈着βAPの前駆蛋白であるβAPPの由来を明らかにする目的で、4%パラフォルムアルデヒドで灌流固定されたイヌの脳に対する1)βAPP免疫染色と2)βAPPmRNA In situハイブリダイゼーション法との二重染色の実施および血管壁構成諸細胞内でのβAPPmRNA発現とβAPPおよびβAPの局在についての観察を計画した。そのため、イヌ脳凍結材料を用いβAPPmRNA In situハイブリダイゼーション法に必要なセンスおよびアンチセンスRNAプローブの調整を行った。
その結果、
1)抗βAPPモノクローナル抗体(βAPPc末認識抗体、ベーリンガー・マンハイム山之内社)陽性所見が血管壁および一部の神経細胞体に認められた。
2)PCR法により、イヌβAPPmRNA検出のための複数(6種類)のcDNA断片が回収された。
これらのDNA断片のうち、どの断片がイヌの脳におけるβアミロイド蛋白沈着に関連するか現在検討中である。
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