ヒト副腎皮質ステロイド合成・分泌への成長因子及びサイトカインの作用機序の検索-ストレスへの新しい生体防御機序の解明-

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06670181
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 笹野 公伸 東北大学, 医学部, 助手 (50187142)
• 研究分担者: 高橋 和宏 東北大学, 医学部, 助手 (80241628) ; 前原 郁夫 東北大学, 医学部, 助手 (10240665)
• キーワード: 副腎皮質 / ステロイド / 成長因子 / 免疫組織 / in situ hybridization / 培養 / 画像解析

研究概要

ヒト正常副腎ならびに種々の副腎皮質疾患に於いて、成長因子であるTGFα、EGF及びその受容体であるEGFRの発現を免疫組織科学及びTGFα、、EGFに関してはoligonucleotideprobeを用いたin situ hybridization法で検討した。EGFR、TGFαは正常及び副腎皮質疾患に於てその発現が蛋白、及びTGFαの場合mRNAレベルでも認められたのに対して、EGFは蛋白mRNA双方のレベルで観察されず、TGFαが副腎皮質細胞で産生されている事が示された。又、TGFαのmRNA発現は副腎皮質癌で著名に見られた事から副腎皮質細胞の悪性化との関連が示唆された。これらの結果はModern Pathologyに掲載済である。又あわせてこれらの副腎の細胞動態を3′-OH nick end labeling法及び細胞増殖関連抗原であるKi67の免疫染色で増殖、細胞死双方の観点から検討した。正常ヒト副腎皮質では外側束状帯細胞から増殖し、球状帯及び網状帯で細胞死という形で除去されていくという事実を初めて示し、これらの成果はModern Pathologyに掲載済である。
遊離細胞実験では、ウシ副腎皮質細胞を用いて培養条件を確立し、ACTHによりcortisolが増加する事を示した。また、ヒト正常副腎に於てもACTHに対してcortisolが反応することを示した。又、これら遊離細胞のステロイド合成酵素の免疫染色の半定量的検索に関しては、J.Histochem.Cytochem.に掲載されたaromataseの画像解析法を基本として、通常の光学顕微鏡に接続して検討する事が可能なシステムをセットした。
3次元培養では正常ヒト副腎の場合、培養開始後6日目まで副腎の形態はnecrosisを伴いながらも保持され、同時にP450_<C17>、3β-hydroxysteroid dehydrogenase等の酵素の発現も見られた。しかしcortisolの産生ACTHに対する反応は決して良好ではなく、今後の課題となった。

研究成果

• [文献書誌] H.Sasano他: "Cell Proliferation and Apoptosis in Normal and Pathologic Human Adrenal" Modern Pathology. 8(1). 11-17 (1995)
• [文献書誌] H.Sasano他: "Carbonic Anhydrases in the Human Adrenal Gland and Its Disorders:Immunohistochemical and Biochemical Studiesof the Enzymes" Endocrine Pathology. 5. 100-106 (1994)
• [文献書誌] H.Sasano: "Localization of Steroidogenic Enzymes in Adrenal Cortex and Its Disorders" Endocrine Journal. 41(5). 471-482 (1994)
• [文献書誌] H.Sasano他: "Transforming Growth Factorα,Epidermal Growth Factor Reseptor Expression in Normal and Diseased Human Adrenal Cortex by Immunohistochemistry and In Situ Hybridization" Modern Pathology. 7(7). 741-746 (1994)
• [文献書誌] H.Sasano他: "ACTH-independent Macronodular Adrenocortical Hyperplasia:Immunohistochemical and In Situ Hybridization Studies of Steroidogenic Enzymes" Modern Pathology. 7(27). 215-216 (1994)
• [文献書誌] T.Suzuki他: "Quantitation of P450 AromataseImmunoreactivity in Human Ovary Duringthe Menstrual Cycle:Relationship Between the Enzyme Activity and Immunointensity" The Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 42(12). 1565-1573 (1994)
• [文献書誌] S.Koizumi他: "Adrenocorticotropic Hormone-Independent Bilateral Adrenocorti-cal Macronodular Hyperplasia:A Case Reprt andImmunohisto-CHEMICAL Studies" Endocrine Journal. 41(1). 429-435 (1994)
• [文献書誌] T.Nishikawa: "Cholera Toxin can ADP-Ribosylate gs as well as Gi-in ACTH-Unresponsive Human Adrenocortical Cancer" Endocrine Journal. 41(5). 593-597 (1994)
• [文献書誌] K.Fukushima 他: "Increased Expression of Mineralocorticoid Receptor in Human Ileum after Total Colectomy:Immunohistochemicaland immuno-blotting Studies" Tohoku Journal Experimental Medicine. 173. 383-390 (1994)
• [文献書誌] N.C.Bennett 他: "Reproductive Suppression in Eusocial Cryptomys Damarensis Colonies:Socilly-Induced infertility in femaies" icine. 233. 617-630 (1994)