脳虚血巣の血小板由来増殖因子のクローニングとインサイツ-ハイブリによる発現解析

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06670223
• 研究機関: 滋賀医科大学
• 研究代表者: 笹原 正清 滋賀医科大学, 医学部, 助手 (20154015)
• キーワード: 脳 / 神経 / マクロファージ / 血小板由来増殖因子 / グリオーシス / 虚血 / 外傷 / 移植

研究概要

1)成熟ラット脳ではin situ hybridizationにより広い範囲にわたる脳神経細胞や下垂体の一部が血小板由来増殖因子(PDGF-B)の遺伝子を発現していることを初めて明らかにした。northern blotにより、これらPDGF-Bの遺伝子が主として3.5kb,および2.6kbのものからなることをしめした。さらにPDGF-Bの増殖促進活性も見い出し、ラット脳に蛋白発現のあることも確認した。
2)ラット局所脳梗塞、砂鼠前脳一過性虚血後の遅延型神経細胞懐死、出生後早期ラットの低酸素/虚血負荷、大脳皮質の刺創等の脳損傷モデルでPDGF-Bおよび受容体発現を調べた。これらの研究より、a)脳のPDGF-B発現は、虚血や外傷により速やかに神経細胞や脳マクロファージで誘導されること、b)PDGF-B発現は脳損傷部位での神経細胞の生存と密接に関連して見られること、c)損傷後の組織には神経細胞やグリア細胞などの広汎な細胞にPDGF-b受容体発現がみらること、d)PDGF-B発現は、損傷後の脳組織の治癒過程での血管新生やグリオーシスの形成と密接に関連していることがあきらかになった。PDGF-Bおよびその受容体の発現が損傷に応じて厳密な発現調節を受けており、損傷時の神経保護作用や損傷修復過程で重要な役割をはたすことを示した。
3)嗅脳の移植におけるPDGF-Bの関与を調べた。我々は以前の研究から嗅脳の発達において、鼻粘膜からの嗅覚神経の軸索伸長にensheathing glial cellが産生するPDGF-Bが重要であることを示唆してきた。本研究では、胎児ラット嗅脳を出生直後のラット脳に移植した。PDGF-B染色性陽性のensheathing glial cellが移植片と周囲の脳の間に新たに形成される神経繊維の形成に関与していることが明らかになった。
今後さらに遺伝子のクローニングを含め多角的に脳におけるPDGFの役割を明らかにしたい。

研究成果

• [文献書誌] SASAHARA Masakiyo: "Expression of platelet-derived growth factor(PDGF-B-chain)in developing and mature rat brain," The eighth international conference of the international society of differentiation(ISD). 124- (1994)
• [文献書誌] TAKAYAMA Syoukei: "Platelet-derived growth factor B-chain-like immunoreactivity in injured rat brain." Brain Res.653. 131-140 (1994)
• [文献書誌] IIHARA Koji: "Ischemia induces the expression of PDGF-B chain in neurons and brain macrophages in vivo" J.Cereb.Blood Flow Metab.14. 818-824 (1994)
• [文献書誌] Kott,J.N.: "Olfactory ensheathing glia and platelet-derived growth factor B-chain reactivity in the transplanted rat olfactory bulb," Int.J.Devl.Neuroscience. 12. 315-323 (1994)
• [文献書誌] TAKAYAMA Syoukei: "Platelet-derived growth factor B-chain like immunoreactivity in injured rat brain," Brain Pathology. 4. 490- (1994)
• [文献書誌] IIHARA Koji: "Coordinate expression of platelet-derived growth factor-B chain and β-receptor in focal ischemia of rat brain," Stroke. 25. 267- (1994)
• [文献書誌] IIHARA Koji: "Induction of Platelet-derived growth factor b-receptor in focal ischemia of rat brain" Brain Pathology. 4. 509- (1994)
• [文献書誌] SASAHARA Masakiyo: "Expression of platelet-derived growth factor B-chain in the mature rat brain and pituitary gland" Mol.Brain Res. (in press). (1995)
• [文献書誌] 笹原正清: "ラット脳における血小板由来増殖因子(PDGF)-B鎖mRNA発現のin situハイブリダイゼーションによる解析" 日本病理学会会誌. 83. 208- (1994)
• [文献書誌] 笹原正清: "ラット脳損傷における血小板由来増殖因子(PDGF)の発現、" 日本病理学会会誌. 83. 272- (1994)
• [文献書誌] 笹原正清: "局所脳虚血における血小板由来増殖因子(PDFG)-B鎖" 日本病理学会会誌. 83. 272- (1994)
• [文献書誌] 大野雅樹: "ラット新生仔低酸素性虚血性脳障害における血小板由来増殖因子(PDGF)の発現、" 日本神経病理学会会誌. 35. 177- (1994)
• [文献書誌] 笹原正清: "成熟ラット脳における血小板由来増殖因子B-鎖発現の解析" 日本神経病理学会会誌. 35. 201- (1994)
• [文献書誌] 高山昌奎: "砂ネズミ一過性前脳虚血モデルにおける血小板由来増殖因子B-鎖の発現" Neurologia medico-chirurgica. 53. 356- (1994)