| 研究課題/領域番号 |
06670240
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
実験病理学
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| 研究機関 | 東海大学 |
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研究代表者 |
谷口 泰史 東海大学, 医学部, 講師 (30207188)
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| 研究分担者 |
守内 哲也 北海道大学, 医学部, 教授 (20174394)
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1995
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| キーワード | ホメオボックス遺伝子 / HOXD3 / 発現ベクターpMAMneo / 赤芽球系白血病細胞 / RT-PCR / R-カドヘリン / R-cadherin / cell adhesion |
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| 研究概要 |
ヒトゲノムより単離したHOXD3ホメオボックス遺伝子を、発現ベクターpMAMneoにセンス方向及びアンチセンス方向に組み込んだ。それをヒト赤芽球系白血病細胞HELに遺伝子導入し、ネオマイシンで安定に形質転換した細胞クローンを選択した。その結果、HOXD3を通常発現(親HEL細胞と同じレベル)しているクローン、過剰発現しているクローン、発現していないクローンの三種類が得られた。それぞれのクローンから細胞質RNAを抽出し、RT-PCR法を用いて細胞接着因子であるカドヘリンの発現を調べた。HOXD3を発現していないクローンでカドヘリン由来の明瞭なDNAフラグメントが認められ、過剰発現しているクローンではまったく認められなかった。このフラグメントをクローニングして塩基配列を決定したところ、ヒトR-カドヘリン由来であることが判明した。以下に、本年度得られた結果を簡単にまとめる。
(1)HEL細胞は、弱いながらも元々R-カドヘリン遺伝子を発現している。
(2)HEL細胞においてHOXD3の発現レベルを上げるとR-カドヘリン遺伝子の発現は減少し、HOXD3の発現レベルが下がるとR-カドヘリン遺伝子の発現は増加する。即ち、HOXD3はR-カドヘリンの発現に対するメガティブなレギュレーターとして機能している。
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