HTLV-1 Taxに結合する未知細胞因子の転写促進機能

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06670316
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 中村 正孝 東北大学, 医学部, 助教授 (30180392)
• 研究分担者: 菅村 和夫 東北大学, 医学部, 教授 (20117360)
• キーワード: HTLV-I / Tax / トランスアクチペ-タ / NF-kB / RNA結合蛋白 / ATL

研究概要

成人T細胞白血病ウイルス(HTLV-I)のTaxは、宿主細胞側の増殖関連遺伝子の転写を活性化し、T細胞がん化に関与していると考えられている。これまで、我々を含めいくつかのグループがTaxに直接会合する因子を同定し、その中にはNF-κBなどのの転写因子が含まれている。しかし、Taxの作用がすべて説明されるには到っていない。本研究では、Taxの免疫沈降物を平衡型、非平衡型二次元電気泳動法を用いて詳細に解析し、Taxと会合する新たな分子を検索した。抗Taxモノクローナル抗体(TAXY-8)でHTLV-I感染細胞(TL-Mor.MT-2,HUT102)、および、Tax遺伝子導入Jurkat細胞(JPX-9)の細胞抽出液を免疫沈降し、沈降物を次元電気泳動により解析した。等電点6.0、分子量120kDa(p120)、および、等電点7.5、分子量70kDa(p70)の2種類の細胞性因子とTaxとの特異的な共沈が、調べたすべての細胞で認められた。それぞれの分子を大量精製し、リジエンドペプチターゼ、トリプシンにより消化し、得られたp120、p70のペプチドフラグメントより分子内アミノ酸配列を決定した。その結果、p120は、6本のペプチドのうち5本のペプチドが転写因子NF-κB2(lyt-10)と同一のアミノ酸配列を示したが、残る1本のアミノ酸配列は異なっていた。このことから、p120はNF-κB2に類似した新たな転写因子であることが示唆された。また、p70は3本のフラグメントのすべてが、ポリ(A)RNA結合蛋白質(PABP-1,2)のRNA結合ドメインと高い(90%)ホモロジーを示したが、同一の配列ではなく、p70はPABPファミリーの新たな一員であることがわかった。現在、これら分子のcDNAのクローニングを行っている。

研究成果

• [文献書誌] Kondo,M.: "Functional participation of theIL-2 receptor γ chain in IL-7 receptor complexes." Science. 263. 1453-1454 (1994)
• [文献書誌] Bank,K: "Effect of p40tax trans-activator of human T cell Iymphotropic virus type I on expression of autoantigens." AIDS Res.Human Retroviruses β and γ chains. 10. 303-308 (1994)
• [文献書誌] Tanaka,N: "Physical and functional association of JAK1and JAK2 tyrosine kinases with the interleukin2 receptor" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 91. 7271-7275 (1994)
• [文献書誌] Ishii,N.: "Expression of the interleukin-2receptor γ chain on various populations in human" Int.Immunol.6. 1273-1277 (1994)
• [文献書誌] Ishii,N.: "Impairment of ligand binding and growth signaling of mutant IL-2 receptor γ chains in patients with X-linked severe combined immunodeficiency." J.Immunol. 153. 1310-1317 (1994)
• [文献書誌] Fujita,N.: "Expression of CD44 in normal human versus tumor endometrial tissues:Possible implication・of reduced expression of CD44in lymph-vascular involvement of cancer cells." Cancer Res. 54. 3922-3928 (1994)
• [文献書誌] Kondo,M: "Exprerssion of the mouse interleukin-2 receptor γ chain in various cell populations of thymus and spleen." Eur.J.Immunol.24. 2026-2030 (1994)
• [文献書誌] Asao,H.: "Interleukin 2-induced activation of JAK2-related kinases:possible involnement in signal transduction for c-myc induction and cell proliefration." FEBS Letter. 351. 201-206 (1994)
• [文献書誌] Kimura,Y: "Sharing of the IL-22 receptor γchain with the functional IL-9recrptorcomplex." Int.Immunol. 7. 115-120 (1995)
• [文献書誌] Yaegashi,N: "Menstrual-dependent expression CD44 in normal human endometrium." Human Pathol.(in press). (1995)
• [文献書誌] Ohbo,K: "Functional of the human interleukin 2 receptor γ chain gene promoter." J.Biol.,Chem.(In press). (1995)
• [文献書誌] Sugamura,K.: "The common γ chain for multiplecytokine receptors." Adv.Immunol.(In press). (1995)