ウイルス誘導細胞融合の分子制御機構

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06670325
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 伊藤 康彦 三重大学, 医学部, 教授 (00022872)
• キーワード: ウイルス / Fusion / FRP-1 / CD98

研究概要

本研究では、ウイルス誘導細胞融合を制御する宿主側因子、Fusion Regulatory Factor-1(FRP-1)、の分子的実体の解明を主目的にした。
1。抗FRP-1抗体を用いたアフィニテイー・力ラムを使用してFRP-1を精製した。
2。精製したFRP-1のN-末端のアミノ酸のシークエンシングを行い、N-末端のアミノ酸のシークエンスを決定したところ,CD98/4F2分子とかなりの一致をみた。
3。抗CD98/4F2抗体の生物活性を調べたところ、抗FRP-1抗体の生物活性と一致した。
4。CD98/4F2分子に対するcDNAをPCRを用いて作製し、発現ぺク夕一に挿入し、マウス由来細胞L_<929>細胞にそのぺク夕一をトランスフェクトした(L_<929>-CD98細胞)。L_<929>-CD98細胞は抗CD98/4F2抗体と抗FRP-1抗体の両方に反応する分子を細胞表面に発現していた。
5。L_<929>一CD98細胞にNewcastle disease virus (NDV)を感染させただけでは、細胞融合は出現しないが、NDV-感染L_<929>-CD98細胞に抗FRP-1抗体を作用させると、細胞融合が出現した。この事実はFRP-1/CD98分子がウイルス誘導細胞融合を制御する宿主側のkey factor であることを示している。
6。抗FRP-1抗体のなかにはenhancing antibodyとinhibitory antibody が存在していることが明らかになった。
7。FRP-1システムとFRP-2システムとの問にはcross-talk が存在していること明らかにした。
8。ヒト生体内でのFRP-1とFRP-2分子発現細胞の組織分布を明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Yasuhiko Ito: "HN proteins of human parainfluenza type 4A virus expressed in cell Iines transfected with a cloned cDNA have an ability to induce interferon in mouse spleen cells" Journal of General Virology. 75. 567-572 (1994)
• [文献書誌] Hisataka Ohta: "Molecular and biological characterization of fusion regulatory proteins (FRPs) Anti-FRP mAbs induced HIV-mediated cell fusion via an integrin system。" EMBO Journai. 13. 2044-2055 (1994)
• [文献書誌] Machiko Nishio: "Fusion properties of cells constitutively expressing human parainfluenza type 4A HN and F virus glycoproteins。" Journal of General Virology. 75. 3517-3523 (1994)
• [文献書誌] Nobutada Tabata: "Expression of fusion regulatory proteins (FRPs) on human peripheral blood monocytes Induction of homotypic cell aggregation and formation of multinucleated giant cells by anti-FRP-1 monoclonal antibodies" Journal of lmmunology. 153. 3256-3266 (1994)
• [文献書誌] Nobutada Tabata: "Tissue distribution of fusion regulatory protein-1 and fusion regulatory protein-2" Archives of Pathology and Laboratory Medicine. 119 in press. (1995)
• [文献書誌] Tetsuya Yuasa: "A cell fusion-inhibiting monoclona antibody binds to the presumed stalk domain of the human parainfluenza type 2 virus hemagglutinin-neuraminidase protein。" Virology. 206(in press). (1995)