粘膜ワクチンのアジュバントの開発に関する研究

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06670339
• 研究機関: 国立予防衛生研究所
• 研究代表者: 田村 慎一 国立予防衛生研究所, 感染病理部, 室長 (20100084)
• 研究分担者: 倉田 毅 国立予防衛生研究所, 感染病理部, 部長 (50012779)
• キーワード: インフルエンザワクチン / コレラトキシン / コレラトキシンBサブユニット / IgA抗体

研究概要

我々はこれまでに、マウスのレベルでの実験によって、コレラトキシン(CT)の無毒の成分Bサブユニット(CTB)を用いた経鼻接種インフルエンザ不活化ワクチンの有効性を示す証拠を確実に蓄積して来ている。しかしながら、これをヒトに適用しようとする時、アジュバントの性質がさらに詳細に検討される必要がある。一方、CTBそのものにはアジュバント活性がないことを示す報告がなされている。そこで本年度は、微量のCTを添加した精製CTBのアジュバント作用を検討した。また、組換えDNAを用いて作製した大腸菌易熱性毒素(LT)とLTBを用いて同様のことを検討した。即ち、マウスにワクチン(5μg)と共に微量のトキシン(0.02-20ng)を添加したBサブユニット(2μg)を経鼻投与した。4週間後にワクチンのみを2次経鼻投与して2週間後に血中および鼻洗浄液中のIgAおよびIgG抗体価を測定した。その結果、Bサブユニットのみをワクチンと共に投与した群では、ほとんど抗体応答が誘導されなかった。また、トキシンのみをワクチンと共に投与した群では、2ng以下ではほとんど応答が誘導されなかった。一方、トキシン添加Bサブユニットをワクチンと共に投与した群では、トキシンの投与量が多くなる程高いレベルの抗体応答が誘導された。このトキシンとBユニット間のアジュバント作用に関する相乗効果は、1次抗体応答のみでなく2次抗体応答でも認められ、2次応答が1次の約10倍のレベルであった。また、この相乗効果は鼻の洗浄液のIgA抗体応答に関しても認められた。このアジュバント作用によって産生される抗体量は、ウイルス感染に対して完全な防御能を発揮するのに充分のものであった。また、この添加トキシンの量は、ヒトのレベルで毒性を発揮するレベルを下回っていた。これらの結果は、微量のトキシン(約0.1%)を含むBユニットがヒトの経鼻ワクチンのアジュバントとして実際に使われ得ることを示唆している。

研究成果

• [文献書誌] Tamura,S.-I.et al.: "Formulation of inactivated influenza vaccines for providing effective cross-protection by intranasal vaccination in mice." Vaccine. 12. 310-316 (1994)
• [文献書誌] Tamura,S.-I.et al.: "Synergistic action of cholera toxin B subunit (and E.coli heat-labile toxin B subunit) and a trace amount of cholera." Vaccine. 12. 419-426 (1994)
• [文献書誌] Tamura,S.-I.et al.: "E.coli heat-labile enterotoxin B subunits supplemented with a trace amount of the holotoxin as an adjuvant for nasal influ…" Vaccine. 12. 1083-1089 (1994)
• [文献書誌] Tamura,S.-I.et al.: "Effect of cholera toxin adjuvant on IgE antibody response to orally or nasally administered ovalbumin." Vaccine. 12. 1234-1240 (1994)
• [文献書誌] Tamura,S.-I.et al.: "Mechanism of enhancement of the immune responses to influenza vaccine with cholera toxin B subunit and a trace amount of ……" Vaccine. (in press). (1994)
• [文献書誌] Asanuma,H.et al.: "Cross-protection against influenza virus infection in mice vaccinated by combined nasa1/subcutaneous administration." Vaccine. (in press). (1994)