活性酸素によるインターロイキン8産生誘導機構の分子生物学的解析

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06670346
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 向田 直史 金沢大学, がん研究所, 助教授 (30182067)
• キーワード: インターロイキン8 / NF-κB / IκB / リン酸化酵素 / 抗酸化剤

研究概要

本年度において、種々の抗酸化剤のインターロイキン8(以下IL-8と略す)遺伝子発現への影響について、ヒト単球細胞株THP-1細胞を用いて検討した。用いた種々の抗酸化剤は明らかな遺伝子発現抑制効果を認めなかったが、これは用いた抗酸化剤の細胞への透過性などに問題がある可能性があると考えた。この点を解決するために、IL-8遺伝子発現に最も重要である転写因子NF-κBの活性化をリガンドであるリポ多糖類依存性に引き起こす系を、無細胞系で確立した。この系を用いることによって、NF-κBの活性化に先立ちその細胞内阻害因子であるIκBのリン酸化が起きる一方で、IκBの分解はNF-κBの活性化には必須では無いことを明らかにした。また、NF-κBの活性化にはスタウロスポリン感受性リン酸化酵素とチロシン・リン酸化酵素が関与するのに対して、IκBのリン酸化にはチロシンリン酸化酵素のみが関与していることを示唆する結果を得て、J.Biol.Chem.に報告した。現在、NF-κBの活性化機構のうちで、特にIκBリン酸化酵素の同定を行っており、同定したさいには種々の抗酸化剤のこの酵素活性への影響について検討する予定である。
さらに、本年度はIL-8遺伝子転写を抑制することが知られている。FK506・糖質ステロイド・インターフェロンの作用機構についても解析を加え、
1.FK506がAP-1・NF-κB領域を介するカルシウム依存性のIL-8遺伝子転写を抑制する
2.糖質ステロイド・インターフェロンは、NF-κBの活性化を抑制することによって、IL-8遺伝子発現を抑制する
という結果を得、J.Biol.Chem.・Mol.Cell.Biol.に報告した。

研究成果

• [文献書誌] Harada,A.et.al.: "Cloning of cDNA encoding a mouse homolog of the interleukin 8 receptor." Gene. 142. 297-300 (1994)
• [文献書誌] Oliveira,I.C.et.al.: "Transcriptional inhibition of the interleukin 8 gene by interferon is mediated" Mol.Cell Biol.14. 5300-5308 (1994)
• [文献書誌] Okamoto,S.et.al.: "The interleukin-8 AP-1 and kB-like sites are genetic end target of FK506-sensitive pathway" J.Biol.Chem.269. 8582-8589 (1994)
• [文献書誌] Mukaida,N.et.al.: "Molecular mechanism of interleukin 8 gene expression." J.Leukocyte Biology. 56. 554-558 (1994)
• [文献書誌] Yasumoto,K.et.al.: "Molecular analysis of cytokine network involbed in causing cachexia in colon 26" Cancer Res.55. 921-927 (1995)
• [文献書誌] Ishikawa,Y.: "Establishment of lipopolysaccharide-dependent nulear factor-kB activation in a cell-free system." J.Biol.Chem.270. 4158-4164 (1995)
• [文献書誌] Mukaida,N.et.al.: "Novel Mechanism of Glucocorticoid-mediated Gene Repression:nuclear factor-kB is target for glucocorticoid-mediated interleukin 8 gene repression." J.Biol.Chem.269. 13289-13295 (1994)
• [文献書誌] Wada,T.et.al.: "Prevention of proteinuria by the administration of anti-interleukin 8 antibody in experimental acute immune complex-induced glomerulonephritis." J.Exp.Med.180. 1135-1140 (1994)
• [文献書誌] Murayama,T.et.al.: "Enhancement of human cytomegalovirus replication in human lung fibroblast cell line by interleukin 8." J.Virol.68. 7582-7585 (1994)