| 研究課題/領域番号 |
06670503
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
内科学一般
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| 研究機関 | 日本大学 |
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研究代表者 |
澤田 滋正 日本大学, 医学部, 助教授 (40130520)
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| 研究分担者 |
三田村 巧 日本大学, 医学部, 助手
武井 正美 日本大学, 医学部, 助手 (30179600)
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| 研究期間 (年度) |
1994 – 1996
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| キーワード | 慢性関節リウマチ / 内在性レトロウイルス / sCD4 / 滑膜 / 末梢血リンパ球 / Polymerase chain reaction / Fluoreccein Diffecntial / HIV |
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| 研究概要 |
CD4mRNAのalternative splicingの有無を検討するためプライマーをCD4の膜貫通部をはさむよう設定し、正常者リンパ球、T細胞株を抗CD3抗体、mitogenで刺激し、またsCD4の高値を示した症例のリンパ球をPCR法を用いてmRNAの検出を施行した。その結果、予測sizeと異るalternative splicingを示唆するsizeのbandは増幅できなかった。全身性エリテマトーデス、シェ-グレン症候群、慢性関節リウマチ患者のうち、sCD4分子の高値の患者を集め、リンパ球、滑幕組織を用いて未知のレトロウイルスの存在を検討した。CD4結合部位でレトロウイルス共通に見い出される部位であるHIVのgp120のpoint mutationの少ない部位を増幅するプライマーを設定しRT PCR法でmRNAの発現をsCD4分子高値の患者のリンパ球と滑膜組織で検討した。その結果20例の検索では全て陰性であった。そこでFluorescein Differential Display法を用いて、sCD4分子高値の慢性関節リウマチ患者と正常者リンパ球の遺伝子の発現変動を検索し正常者では発現されていない遺伝子断片のサブクローニングを自動塩基配列解析装置で施行し、そのうちの1つのタッグがマウスの乳癌内在性レトロウイルスのHERV-kと相同性を持つことがわかった。現在この遺伝子が疾患特異的に発現しているかRTPCR法で解析を行っている。
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