肝細胞膜に存在する肝細胞増殖促進因子の精製

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06670524
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 平田 啓一 東京大学, 医学部(病), 助手 (50199064)
• 研究分担者: 富谷 智明 東京大学, 医学部(病), 医員 (90227637) ; 藤原 研司 埼玉医科大学, 医学部, 教授 (80101088)
• キーワード: 蛋白 / 肝細胞膜 / 細胞増殖

研究概要

【.encircled1.】肝細胞膜の肝細胞増殖促進因子の部分精製及びこれを認識する抗血清の作製
当初は、肝細胞膜可溶化分画をさらに部分精製し、それを用いて抗血清を作製しようと計画し、陰イオン及び洋イオン交換樹脂カラム、糖蛋白に特異性の高いアフィニティカラム等で部分精製の進展を目指したが、カラム操作による収率の低下等の要因から部分精製は困難であった。このため、肝細胞膜、及び、その可溶化分画を用いて抗血清の作製に着手した。その結果、本因子の作用に拮抗する抗血清作製に成功した。この抗血清は多数の肝細胞膜蛋白を認識するが、肝細胞膜を可溶化して得た本因子を含むと考えられる部分精製分画については、認識する蛋白は約十種であることがImmunoblottingにより確認された。
【.encircled2.】肝細胞膜の肝細胞増殖促進因子の作用機序の検討
肝細胞膜及びTGF-βをG_1期後期の肝細胞に作用させると肝細胞膜はTGF-βの増殖抑制作用を著明に軽減させた。TGF-βの作用は主としてG_1期後期におけるRb蛋白のリン酸化の抑制を介するものと考えられている。肝細胞膜の増殖促進因子の作用点がTGF-βの情報伝達系に関連するG_1期後期であることが改めて示唆された。TGF-βは生体内でも肝細胞増殖に抑制的に作用しうるサイトカインの一つとして重要視されつつある。また増殖点からも本因子の意義が注目される。

研究成果

• [文献書誌] Fijiwara K.,Hirata K.et al.: "The uye of Prustaglondin I_2 analog in the treatment of Massire Hepatic Necrosis Associated with Endshelial cell injnry and diffuse sinusoidal fibrin deposition." Dig.Dis.and Sci.(in press). (1995)
• [文献書誌] Nagoshi S.and Fujiwara K.: "Putrescine as a comitogen of epidermal growth facta in rat lirer growth." Hepatology. 20. 725-730 (1994)
• [文献書誌] Ohno A.,Hirata K.,et al.: "Fat-storing cell abnormality associated with endothelial cell damage after culd ischemic storage of rat liver in UW solution." Dig.Dis.and Sci.39. 861-865 (1994)
• [文献書誌] Fijiwara K.,Hirata K.,et al.: "Stimulation of liver growth by exagenous human Nepatocyte gernth factor in normal and partially hepatectomized rats." Hepatology. 18. 1443-1449 (1993)
• [文献書誌] Tomiya T.,and Fujiwara K.: "Serum levels of transforming growth factor d in petients after.partinl kepatectomy as determined whth an enzyme-linked immunosorbzut assay." Hepatology. 17. 304-308 (1993)
• [文献書誌] Ikeda H.,and Fujiwara K.: "Evidence that impaired intracellular collagen synthesis reduces proliteration in cultured rat hepatocytes." Biochen.Biophys.Res.Commun.200. 1701-1707 (1994)