肝毛細胆管膜における脂質透過性を制御する因子に関する研究

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06670557
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 田妻 進 広島大学, 医学部附属病院, 助手 (80201614)
• キーワード: 胆汁酸 / 毛細胆管 / 肝内輸送 / 脂質 / 胆汁分泌 / ヴェジクル / ライポソーム / アシル鎖脂肪酸

研究概要

胆汁中へ分泌される脂質の起源は肝小胞体であり、脂質はヴェジクルとして毛細胆管膜まで肝内を移動し、ある種の選択性を受けて胆管側へシフトして胆汁中へ分泌されると推定されている。胆汁中脂質の存在様式の安定性は脂質担送体の構成リン脂質の疎水性強度に規定され、肝脂質排泄機構におけるリン脂質分子種選択性の制御は胆道の病態生理(例えば胆汁うっ滞、胆石形成など)に深く関わっている。本研究では、初年度に人工膜ヴェジクルを用いてリン脂質癒合過程におけるアシル鎖脂肪酸の飽和度の律速的意義を確かめ、肝毛細胆管膜と肝内ヴェジクルの癒合を制御する因子としての可能性を示した。さらに今年度は、実際にラット肝から調製された生体膜ヴェジクルとの癒合現象の制御機構を検討した。
カルシウム沈殿法にて調製したラット肝毛細胆管膜ヴェジクルを用いて、ロダミンにて標識したフォスファチジルセリン・フォスファチジルコリン混合ライポソームをプローベとして、凝集・融合態度を経時的に観察してその物性の特徴を検討した。Self-quenchingの解除から検出される蛍光強度の増強、video-enhanced differential contrast microscopyによる形態学的観察、laser scattering intensityによるサイズ検索から総合的に解析し、ライポソームの融合性は構成するリン脂質のアシル鎖脂肪酸の不飽和度(逆相HPLCによって算出された疎水性強度)に依存することが明らかとなった。即ち、ヴェジクルを構成するリン脂質のアシル鎖脂肪酸の不飽和結合の存在が、肝内ヴェジクルの毛細胆管側への融合性を規定しており、極性への関与が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Susumu Tazuma: "Effects of long-term treatment with low-dose pravastatin on biliary lipid. metastability in patients with nonfamilial hyperlipoproteinemia." Metabolism. 44. 1410-1412 (1995)
• [文献書誌] Susumu Tazuma: "Effects of fluvastatin on human biliary lipids." American J Cardiology. 76. A110-A113 (1995)
• [文献書誌] Hiroyuki Miura: "Partial characterization of regulation of biliary lecithin hydrophobicity:Association with organic anion-induced cholestasis." Biochemical J. 312. 795-797 (1995)
• [文献書誌] Susumu Tazuma: "Bile acids in gastroenterology:Basic and clinical advances." Lancaster,MTP press(Lancaster). Hofmann, A.F., Paumgartner, G.Stiel, A., 402 (1995)
• [文献書誌] Susumu Tazuma: "Clinical Studies in Medical Biochemistry." Oxford University Press Inc. (New York). Glew, RH & Ninomiya,Y(2nd eds).(in press), (1995)