肺線維化のサイトカインからの病態解析と治療法確立のための基礎的検討

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06670616
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 大串 文隆 徳島大学, 医学部・付属病院, 講師 (80201375)
• 研究分担者: 曽根 三郎 徳島大学, 医学部, 教授 (40145024)
• キーワード: 肺線維芽細胞 / iuterleukin-1 / Prostaglaudin E_2 / Cyclooxygeuase 1 / Cyclooxygeuase 2

研究概要

プロスタグランディンE2(PGE2)は、線維芽細胞増殖やコラーゲン産生を抑制することがしられており、線維化病態では重要なメディエーターである。また病変部では種々のサイトカインが産生され各細胞におけるPGE2産生を調節していると考えられる。線維芽細胞のPGE2の産生機構を解析する目的に、代表的炎症性サイトカインであるインターロイキン1b(IL-1)で線維芽細胞を刺激しPGE2産生につき律速酵素であるシクロオキシゲナーゼ1(COX1)とCOX2の動態を中心に以下の面より検討した。(1)PGE2産生:培養上清中のPGE2産生をRIAにて測定した。線維芽細胞はIL-1刺激により濃度、時間依存的にPGE2を産生した。またその産生量は血清の存在により増強された。COX活性の測定:COX活性は刺激された細胞を超音波破砕後、基質であるアラキドン酸から生成物への変換率で評価した。COX活性はIL-1刺激により濃度及び時間依存的に増強された。また、IL-1によるPGE2産生及びCOX活性増強作用は、COX2の選択的阻害剤であるNS-398、転写阻害剤であるアクチノマイシンD,翻訳阻害剤であるシクロヘキシミド添加により抑制された。(3)COX1及びCOX2mRNA発現:線維芽細胞はIL-1刺激に関係なくCOX1のmRNAを発現していたがCOX2mRNA刺激4時間後をピークに誘導が認められた。
以上のことより炎症性サイトカインと肺線維芽細胞との相互作用が重要であることが示唆され、PGE2産生にはCOX2が重要であることが判明した。次に病態下の線維芽細胞とサイトカインの相互作用についてPGE2産生の面からの解析が必要と思われた。

研究成果

• [文献書誌] Eudo T: "Induction of cyclooxygenase-2 is vespousible for iuferleukiu 1β Depeudeut Prostaglaudiu E_2 synthosis by huwou lcug fibroblast" Am J Respir Cell Mol.Biol. (in press).
• [文献書誌] Kamada M.etal: "Detection of immunoglcbulin biwding factor by enzgme-linked immunosorbeut assay using two monodoual antibadies" Riochem.Mol.Biol.Intern. 34. 837-844 (1994)
• [文献書誌] Sone S etal: "Draduction of IL-1 and its receptor antagonist is ragulated differently by IFN-r and IL-4 in human monocytes and olveolgv mocvophases" Eur.Respir J. 7. 657-663 (1994)
• [文献書誌] 朝田完二: "ブレオマイシン投与ラット肺線維芽細胞の増殖能及びその増殖に対するIL-12の効果" 日胸疾会誌. 32. 555-560 (1994)
• [文献書誌] Sone S: "Cy tokine Production by human alveolar macroplose and its vegulatorg getuork,Basic and Clinical aspects of pulmonaryy fibrosis" CRC Press ed.T.Takishiua, 147-163 (1994)
• [文献書誌] Ogushi F: "Role of inter leukin-1 in Pulwouery fibvosis Basic and Clilnical aspects of pulwovery fibvosis" CRC Press ed T Takishiwa, 75-87 (1994)