| 研究課題/領域番号 |
06670735
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| 研究機関 | 横浜市立大学 |
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研究代表者 |
高崎 泉 横浜市立大学, 医学部, 講師 (00244492)
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| 研究分担者 |
石井 當男 横浜市立大学, 医学部, 教授 (90010363)
塩之入 洋 横浜市立大学, 医学部, 講師 (20128599)
後藤 英司 横浜市立大学, 医学部, 講師 (30153753)
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| キーワード | フィブロネクチン / 摘出血管 / 発現調節因子 / 動脈硬化症 / 高血圧 |
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| 研究概要 |
【研究目的・方法】ラットおよびヒトの摘出血管を用い、in vitroの実験系を応用し、血管壁におけるフィブロネクチン(FN)の発現調節機構を明らかにすることを目的とする。本年度の実験では、昨年度に引き続きバルーンカテーテルによる物理的加圧・拡張が摘出血管におけるFNおよび増殖関連遺伝子であるプロトオンコジーン(c-fos)発現に与える影響を検討した。血管壁FN、c-fosの発現はNorthern bolt法にて分析した。【研究費の使途】上記の実験を施行するため、研究費の多くをノーザンブロット用消耗品の購入費用に充当した。【今年度得られた結果】ラット下行大動脈およびヒト胃大網動脈(胃全摘手術により得られる摘出標本より採取)より長さ約2cmの摘出血管を作成し、血管拡張用バルーンカテーテルを挿入し、6気圧にて内腔より拡張し、そのFN発現におよぼす影響を観察した。摘出血管におけるFNの発現は最初の24時間の培養にて著しく増加するが、バルーンカテーテルによる加圧・拡張はその発現レベルに有意な変化を及ぼさなかった。細胞外マトリクスの重要な構成要素であるエラスチンの発現は、FNと異なり著減するが、バルーンカテーテルによる加圧・拡張はこれに対しても有意な変化を惹起しなかった。一方、摘出血管におけるFNの発現増加に先行してc-fosの発現が培養後超早期に著増することが明らかになった。このc-fosの発現増加の経時的変化は2-3時間をピークとし、約24時間近く持続するもので、培養細胞で得られているこれまでの結果と比較して、より長期にわたる発現レベルの増加であった。このc-fosの発現に対してもバルーンカテーテルによる加圧・拡張は有意の変化を及ぼさなかった。【総括】プロトオンコジーンの発現増加がおこり、それに引き続いてFNの発現増加が生じている可能性がある。いずれの過程に対しても今回の実験条件下ではバルーンカテーテルによる加圧・拡張はこれらの遺伝子の発現増加機構に影響を及ぼさない可能性が高いことが明らかになった。また摘出血管を用いて行った本実験系にて明らかになったことは培養細胞を用いて行った実験から得られた結果と異なり、本来の血管壁構造を有する摘出血管の実験系が生体における細胞と細胞外マトリクスとの相互作用をより正確に反映している可能性があり重要と考えられる。
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