心筋症ハムスターにおけるADP/ATP担体蛋白の分子生物学的解析

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06670745
• 研究機関: 東京慈恵会医科大学
• 研究代表者: 加藤 光敏 東京慈恵会医科大学, 医学部, 講師 (60177475)
• キーワード: ADP / ATP担体蛋白 / ミトコンドリア / 心筋症ハムスター

研究概要

平成7年度は、心筋症ハムスターJ2Nを用いて心筋ミトコンドリアを分離しADP/ATP担体蛋白、以下AACの蛋白含有率を測定。J2NにはAACの量的異常が存在していることを確認した。このAACはミトコンドリア内膜に存在するADP、ATPの輸送を行う重要な蛋白質であるが、分子生物学的手法を用いてさらにAACに関して検索した。AACのクローニングはゴールデンハムスター心筋よりmRNAを抽出し逆転写酵素を用いてcDNAを合成した。cDNAよりphage vectorでcDNA libraryを作成した。またヒトfibloblast由来のcDNA liblaryより、PCR法にてAAC cDNAクローンを得た。これをプローブとしてハムスターcDNA libraryよりplaque hybridization法を用いてAACのisoenzymeのクローニングを行った。次にAACのmRNAのレベルにおいての発現をdot blot hybridizationを用いて測定したところ、AACのmRNAレベルでの発現は正常ハムスターが最も強く発現していた。以上のように心筋症の程度が強いハムスターほどAACが低下しており、さらにAACの減少と共にmRNAレルでの発現低下の存在が認められた。

研究成果

• [文献書誌] KATO M: "Molecular biological and quantitative abnormalities of ADP/ATP carrier protein in cardiomyopathic hamsters" Euro. Heart J.(in press).
• [文献書誌] KATO M: "Abnormalities of ADP/ATP carrier protein in J-2-N cardio myopathic hamsters." Mol. Cell Biochem.119. 89-94 (1993)
• [文献書誌] KATO M: "Molecular biological changes of adenine nucleotide translocator in J-2-N cardiomyopathic hamsters" Mechanisms of Heart Failure. 197-202 (1994)
• [文献書誌] KATO M: "Quantitative abnormalities of ADP/ATP carrier protein in cardiomyopathic hamsters." The Adaptes Heart. Chap7. 91-98 (1994)
• [文献書誌] KATO M: "Effects of Angiotenis-Converting-Enzyme inhibitors and prostagrandin E_1 derivatives on cardiomyopathic hamster." The Cardiomyopathic Heart. Raben Press. Chap17. 157-164 (1994)
• [文献書誌] TAKEDA N KATO M: "Altelations of myocardial contractility in cardiomyopathic J-2-N hamsters" The Cardiomyopathic Heart. Chap23. 23-30 (1994)