ペルオキシソームβ酸化系酵素欠損症の分子遺伝学的研究

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06670781
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 鈴木 康之 岐阜大学, 医学部附属病院, 講師 (00163014)
• キーワード: ペルオキシソーム / β酸化系 / アシル-CoAオキシダーゼ / 二頭酵素 / 遺伝子

研究概要

臨床的に重度の精神運動発達遅滞、特異顔貌、肝障害をみとめ、相補性解析によりペルオキシソームβ酸化系酵素のアシル-CoAオキシダーゼ(AOX)欠損症および二頭酵素(PH)欠損症と診断された4症例の遺伝子レベルの成因を明らかにし、診断・治療法を開発することを目的として研究を行い、以下の成果を挙げた。
1)ラットcDNAをプローブとして用い、ヒトAOXの全長cDNAをクローニングした。ヒトcDNAは3083bpで、661アミノ酸をコードし、C末にはペルオキシソーム局在シグナルであるSKL motifを有し、ラットと89%のホモロジーを有していた。
2)上記ヒトAOXcDNAの塩基配列に基づき、AOX欠損症同胞例(近親婚)の変異解析を行い、1アミノ酸置換(M278V)を見い出した。両親は本変異の保因者であった。
3)ラットPHcDNAをプローブに用いてヒトPHcDNAを既報のものとは独自にクローニングしたところ、11カ 所で塩基の相違(うち8箇所はアミノ酸も変化)を認めた。このPHcDNAの塩基配列に基づき、PH欠損症2例の変異解析を行いA274T変異をホモで見い出した。
以上、ペルオキシソームβ酸化系酵素欠損症の分子遺伝学的基礎を確立できた。

研究成果

• [文献書誌] T Aoyama,Y Suzuki,et al.: "Molecular cloning and functional expression of a human peroxisomal acyl-coenzyme A oxidase." Biochem Biophys Res Commun. 198. 1113-1118 (1994)
• [文献書誌] Y Suzuki,N Shimozawa,et al.: "Novel subtype of peroxisomal acyl-CoA oxidase deficiency and bifunctional enzyme deficiency with detectable enzyme protein." Am J Hum Genet. 54. 36-43 (1994)
• [文献書誌] Y Suzuki,N Shimozawa,et al.: "Prenatal diagnosis of peroxisomal disorders. Biochemical and immunocytochenical studies on peroxisomes in human amniocytes." Brain & Development. 16. 27-31 (1994)
• [文献書誌] Y Suzuki,N Shimozawa,T Orii: "Inborn Error of peroxisome biogenesis and brain malformation: Clinical and biochemical studies." Cong Anom. 35. 43-53 (1995)
• [文献書誌] T Tuskamoto,Y Suzuki,et al.: "Peroxisome assembly factor-2; a putative ATPase cloned by functional complementation on a peroxisome-deficient mammarian cell mutant." Nature Genetics. 11. 395-401 (1995)
• [文献書誌] Y Suzuki,N Shimozawa,et al.: "Peroxisomal disorders: clinical aspects." Ann N. Y. Acad Sci. (in press).
• [文献書誌] 鈴木康之: "臨床DNA診断法" 金原出版, 1134 (1995)
• [文献書誌] 鈴木康之、下沢伸行、折居忠夫: "遺伝子診断実践ガイド" 中外医学社, 485 (1995)