• 研究課題をさがす
  • 研究者をさがす
  • KAKENの使い方
  1. 課題ページに戻る

1996 年度 研究成果報告書概要

イヌモデルを用いた血友病Aインヒビターの治療に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号 06670819
研究種目

基盤研究(C)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 小児科学
研究機関奈良県立医科大学

研究代表者

嶋 緑倫  奈良県立医科大学, 医学部, 助教授 (30162663)

研究分担者 田中 一郎  奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (00201616)
研究期間 (年度) 1994 – 1996
キーワード血友病A / インヒビター / 第VIII因子
研究概要

純化第VIII因子を固相化させたポリスチレン製プレートを用いた酵素抗体法により、Igクラス、IgGサブクラスの測定を行った。いままでに治療歴のない重症血友病A患者3症例においてインヒビターが発生したが、IgG,IgG4のみ陽性であった。IgMは検出されず、血友病Aインヒビターは発生初期から、IgG4がその本態であることが明らかになった。
C2ドメインをグルタチオンSトランスフェラーゼ融合蛋白として大腸菌にて発現させ、トリトンX-100で可溶化後グルタチオンカラムにてC2ドメイン融合フラグメントを純化した。本フラグメントは固相化純化フォン・ウイルブランド因子およびリン脂質に濃度依存性に結合した。従って、第VIII因子のフォン・ウイルブランド因子およびリン脂質への結合にはC2ドメインが直接関与していることが明らかになった。
軽鎖認識タイプの5症例のインヒビターのエピトープ解析を軽鎖リコンビナントフラグメントを用いたイムノプロット解析にて行った。アミノ酸残基2248-2312認識2例、2170-2312 認識1例、2170-2327 1例、2218-2307 1例であった。抑制能の有する重複ペプチドは2308-2312であった。本重複ペプチド領域を中心に15残基からなるペプチドを合成して、第VIII因子/フォン・ウイルブランド因子結合、第VIII因子/リン脂質結合、第VIII因子/抗C2ドメイン認識インヒビター結合について検討を行ったところ、いずれの結合も濃度依存性に抑制した。
イヌ血漿中第VIII因子・抗原は血友病A保因犬で半減し、血友病A犬では測定限界以下であった。イヌ第VIII因子は軽鎖C2ドメイン認識インヒビターに対し、高い交差反応性を示した。今後、血友病犬に中和ペプチドを投与してインヒビター中和療法の検討実験を行う。

  • 研究成果

    (18件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (18件)

  • [文献書誌] Seiki Kamisue: "Abnormal factor VIII Hiroshima:defect in crucial proteolytic cleavage by thrombin at Arg^<1689> detected by a novel ELISA" British Journal of Haematology. 86. 106-111 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Evgueni L Saenko: "A role for the C2 domain of factor VIII in binding to von Willebrand factor" Journal of Biological Chemistry. 269. 11601-11605 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Dorothea Scandella: "Some factor VIII inhibitor antibodies recoginze a common epitope corresponding to C2 domain amino acids 2248 through 2312,which overlap a phospholipid-binding site" Blood. 86. 1811-1819 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Midori Shima: "Measurement of anti-factor VIII IgG,IgG4 and IgM alloantibodies in previously untreated hemophilia A patients treated with recombinant factor VIII." International Journal of Hematology. 62. 35-43 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Midori Shima: "Common inhibitory effects of human anti-C2 domain inhibitor alloantibodies on factor VIII binding to von Willebrand factor." British Journal of Haematology. 91. 714-721 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Hideki Nagase: "Effect of depolymerized Holothurian glycosaminoglycan(DHG)on the activation of factor VIII and factor V by thrombin." The Journal of Biochemistry. 119. 63-69 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Yoshikatu Sawamoto: "Measurement of anti-factor IX IgG subclasses in haemophilia B patients who developed inhibitors with epitopsodes of allergic reactions to factor IX concentrastes." Thrmbosis Research. 83. 279-286 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Evgueni Saenko: "Slowed release of thrombin-cleaved factor VIII from von Willebrand factor by a monoclonal and a human antibody is a novel mechanism for factor VIII inhibition." Jurnal of Biological Chemistry. 271. 27424-27431 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Yoshikatu Sawamoto: "Anti-factor VIII inhibitors alloantibodies recognizing A2 domain in the human factor VIII heavy chain poorly bind to porcine factor VIII." International Journal of Hematology. 65. 151-158 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Kamisue S,Shima M,Nishimura T,Tanaka I,Nakai H,Morichika S,Takata N,Kuramoto A,Yoshioka A: "Abnormal factor VIII Hiroshima : defect in crucial proteolytic cleavage by thrombin at Arg ^<1689> detected by a novel ELISA" British Journal of Haematology. 86. 106-111 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Saenko EL,SShima M,Rajalakshmi KJ,Scandella D: "A role for the C2 domain of factor VIII in binding to von Willebrand factor" Journal of Biological Chemistry. 269. 11601-11605 (1994)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Scandella D,Gilbert GE,Shima M,Nakai H,Eagleson C,Felch M,Prescott RM,Rajalakshmi KJ,Hoyer LW,Saenko EL: "Some factor VIII inhibitor antibodies recognize a common epitope corresponding to C2 domain amino acids 2248 through 2312, which overlap a phospholipid-binding site" Blood. 86. 1811-1819 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Shima M,Sawamoto Y,Nakai H,Kamisue S,Murakami T,Morichika S,Tanaka I,Hayashi K,Yoshioka A: "Measurement of anti-factor VIII IgG4 and IgM alloantibodies in previously untreated hemophilia A patients treated with recombinant factor VIII" International Journal of Hematology. 62. 35-43 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Shima M,Nakai H,Tanaka I,Sawamoto Y,Kamisue S,Morichika S,Murakami T,Yoshioka A: "Common inhibitory effects of human anti-C2 domain inhibitor alloantibodies on factor VIII binding to von Willebrand factor" British Journal of Haematology. 91. 714-721 (1995)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Nagase H,Enjyoji K,Shima M,Kitazato K,Yoshioka A,Saito H,Kato H: "Effect of depolymerized Holothurian glycosaminoglycan (DHG) on the activation of factor VIII and factor V by thrombin" The Journal of Biochemistry. 119. 63-69 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Sawamoto Y,Shima M,Yamamoto M,Kamisue S,Nakai H,Tanaka I,Hayashi K,Giddings JC,Yoshioka A: "Measurement of anti-factor IX IgG subclasses in haemophilia B patients who developed inhibitors with epitopsodes of allergic reactions to factor IX concentrastes" Thrombosis Research. 83. 279-286 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Saenko E,Shima M,Gilbert GE,Scandella D: "Slowed release of thrombin-cleaved factor VIII from von Willebrand factor by a monoclonal and a human antibody is a novel mechanism for factor VIII inhibition" Jurnal of Biological Chemistry. 271. 27424-27431 (1996)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Sawamoto Y,Shima Mi, Tanaka I,Nakai H,Kamisue S,Scandella D,Yoshioka A: "Anti-factor VIII inhibitors alloantibodies recognizing A2 domain in the human factor VIII heavy chain poorly bind to porcine factor VIII" International Journal of Hematology. 65. 151-158 (1997)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より

URL: 

公開日: 1999-03-09  

サービス概要 検索マニュアル よくある質問 お知らせ 利用規程 科研費による研究の帰属

Powered by NII kakenhi