アデノウイルス発現ベクターを用いた腎疾患対する遺伝子治療の試み

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06671128
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 加藤 哲夫 東京大学, 医学部・附属病院(分), 助手 (70194834)
• 研究分担者: 張 漢佶 東京大学, 保健センター, 助手 (30260524)
• キーワード: 遺伝子治療 / アデノウイルス / 肝細胞増殖因子 / 腎臓

研究概要

本研究は腎疾患の遺伝子治療におけるアデノウイルスペクターの有用性を検討すると共に、腎への遺伝子導入技術の確立と腎不全治療への応用を目的として立案された。
平成7年度においては以下のような結果を得た。
1.アデノウイルスペクターの作成 ラット肝細胞増殖因子(HGF)遺伝子コード領域を組み込んだアデノウイルスペクターを癌研究所濱田洋文部長との協同研究で作成し、実験に使用した。2.生体腎への遺伝子導入の方法の開発 アデノウイルスペクターの(1)動脈内注入より遺伝子導入の効率を評価した。3.発現遺伝子、遺伝子産物の検出 導入2〜8週後に導入遺伝子の発現を染色により、またはmRNAの発現をNorthern blot法により測定した。またHGFはimmunoradiometric assay(IRMA)によって測定した。これらの成績では上記(1)〜(4)のいずれの方法においても、遺伝子治療を試みるうえで実用的な量の遺伝子発現は得られなかった。これは同時期に他施設より発表された結果と一致する所見で、腎への遺伝子導入におけるアデノウイルスペクターの限界を示唆する成績である。5.臨床的検討 慢性腎不全におけるHGFの臨床的な意義について慢性血液透析患者、腎移植患者、保存期慢性腎不全のそれぞれについて血中HGFの測定を行ない、腎機能の変化と血中HGFの関係について解析した。腎不全の進行に伴い血中HGFは増加するが、移植により腎機能が正常化してもなおHGF高値が続くことから腎機能の変化によらないHGF産生刺激機構が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Chang H: "Hepatocyte growthfactor and Chronic rend failure" Nephron. 67. 497-498 (1994)
• [文献書誌] Noda,M: "Synergistic stimlation of parathyroid hormone-related peptide gene expression by mechanicalstretch,and,angictension IIin rat aoptic sooth mouscle cells" J.Biol.Chem. 269. 17911-17917 (1994)
• [文献書誌] Chang H: "Highy etticient adenovirus-mediated gene transfen into renal cells in Culture" Kidney Int. 47. 322-326 (1995)
• [文献書誌] Noda,M: "Stretch induted parathyroid hormone-relatedpeptide gene expression;its implication in the regulation of myogenic tone" Current Op in Nephrol Hypertension. 4. 383-387 (1995)
• [文献書誌] Noda,M: "Iuvolvement of cho in GTPrS-induced enhancement of phosphorylation of zokda myosin light chain in ascular smooth muscle cells" FEBS lett. 367. 246-250 (1995)
• [文献書誌] Noda: "Stretch uncl hypertension increase DTHrP gene expression in ascular smooth muscle" Kidney Int. 発表予定.