乳癌に対するホルモン療法の新しいアプローチの検討

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06671235
• 研究機関: 国立小児病院
• 研究代表者: 松岡 秀夫 国立小児病院, 小児医療研究センター・病理病態研究部, 研究員 (20209513)
• キーワード: 乳癌 / ホルモン療法 / 抗エストロゲン剤 / E_2結合剤 / Estrogen receptor / 癌遺伝子 / 癌抑制遺伝子 / サイトカイン

研究概要

【目的】癌細胞の増殖能に基づく定量的assay法を用いて、臨床乳癌細胞のestrogenや、抗estrogen剤であるtamoxifen、estrogen 合剤に対するresponseについて検討すると共に、増殖能に関与しているサイトカイン量や癌遺伝子の発現量を比較検討した。
【方法】(1)F-CSP assay法による感受性試験:接触阻止能を有するBalb/c 3T3 細胞を48穴のウエルにまいてconfluent monolayerを作製。これを3% glutar aldehydeで固定した(F-CSP)。このF-CSPの上では、初代培養の正常細胞の増殖は抑制され、癌細胞の増殖は、plastic plate上よりも良好であることをすでに報告してきた。このような特徴をもつplateを用いて臨床癌細胞に対する性ホルモン、および、ホルモン剤のresponseをみた。(2)組織の一部より、RNAを抽出しサイトカイン(TGF-α、TGF-β、TNF-α、EGFなど)量や、遺伝子(p53、PCNA、nm23など)発現量について検討した。(3)RNAの抽出は、グアニジン・ホットフェノール法にて行い、Northern blotting analysisにて、その発現程度をみた。
【結果】(1)臨床乳癌組織より細切して得られた初代乳癌培養細胞を用いてestradiol(E_2)に対する反応をみたところ、54症例中19例(35%)にE_2によって増殖の抑制される乳癌の存在があることが判った。E_2によって増殖が促進される症例はER陽性症例中にわずか51%、ER陰性症例中では32%と、E_2に対する反応とER量とは必ずしも一致しないことがわかった。また、E_2によって増殖が促進される症例の内、TAMによって抑制される症例は83%((20)/(24))と高率であるのに対し、ER陽性症例中にはわずか51%((18)/(35))であった。(2)E_2によって増殖が抑制される症例の内、estrogen合剤(estracyt、bestrabucil)によって増殖が抑制される症例は、60%(6/(10))、100%(8/8)であった。(3)E_2によって増殖が促進されるヒト乳癌細胞MCF-7では、E_2存在下で癌遺伝子PCNAやc-mycの発現が増強された。一方、E_2によって増殖が抑制されるヒト食道癌細胞KSE-1では、E_2存在下でPCNA、P53、c-mycの発現が抑制された。(4)E_2によって増殖が促進される臨床乳癌組織内には、TGF-α、TGF-β、TNF-α、EGF、IL-2が、それぞれ22%、0%、52%、24%、3%含まれていたのに対し、E_2によって増殖が促進される臨床乳癌組織内には、25%、0%、60%、15%、0%含まれていた。

研究成果

• [文献書誌] H,Matsuoka: "Interrelationship between Estradiol and Tamoxifen Responses for Clinical Breast Carcinoma Cells Cultured on Contact-Sensitive Plates" Jpn.J.Cancer Res.85. 619-625 (1994)
• [文献書誌] 松岡秀夫: "臨床乳癌細胞に対するEstradiolおよび各種ホルモン剤の増殖能に関する定量的解析" 癌と化学療法. 21. 1705-1706 (1994)
• [文献書誌] H.Matsuoka: "Difference in Cytotoxicity of Paclitaxel Neoplastic and Normal Cells" Anticancer Res.14. 163-168 (1994)
• [文献書誌] H.Matsuoka: "Cytotoxicity of CPT-II and SN-38 for Gastrointestinal and Recurrent Carcinomas Cultured on Contact-Sensitive Plates" Anticancer Res.14. 405-410 (1994)
• [文献書誌] H.Matsuoka: "Enhanced Cytotoxicity of CPT-II for Multicellular Tumor Spheroids by concomitant Hyperthermia" Med.Sci,Res.22. 123-125 (1994)
• [文献書誌] H.Matsuoka: "Fixed Contact-Sensitive Monolayers for Indentification and Separation of normal Cells Versus Neoplastic Cells" Proc.Am.Assoc.Cancer Res.35. 368 (1994)