ヒッペル・ソンド-病の腫瘍抑制遺伝子を用いた遺伝子診断及び遺伝子産物に関する研究

1995 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 06671410
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 菅野 洋 横浜市立大学, 医学部, 助手 (40244496)
• 研究分担者: 矢尾 正祐 横浜市立大学, 医学部, 講師 (00260787) ; 執印 太郎 高知医科大学, 医学部, 教授 (80179019) ; 山本 勇夫 横浜市立大学, 医学部, 教授 (30158266) ; 藤井 聡 横浜市立大学, 医学部, 助教授 (90173385)
• キーワード: フォン・ヒッペル・ソンド-病 / 腫瘍抑制遺伝子 / 遺伝子診断 / 遺伝子産物 / 遺伝病 / 母斑病 / 血管芽腫 / 遺伝性脳腫瘍

研究概要

全国の大学、病院に協力を頂き、本邦に約100家系あると推定されるvon Hippel-Lindau(VHL)病の家系の血液を60家系以上集め、これよりDNAを抽出し、VHL腫瘍抑制遺伝子の分析に供した。分析方法は、VHL腫瘍抑制遺伝子を構成する3つのエクソンについて、polymerase chain reaction(PCR)法により、遺伝子を増幅後、電気泳動して、single strand conformational polymorphism(SSCP)解析を行い、異常の泳動パターンが認められた家系のDNAについては、direct sequence法にて塩基配列の解析を行った。また、SSCP解析にて異常が認められなかったVHL病の家系のDNAについては、southern blot法にて解析を行った。この結果、分析を終了した45家系のうちSSCP解析にて23家系に、southern blot法により、3家系、計26家系に遺伝子の変異を認めた。遺伝子変異様式は、アミノ酸の置換が14家系、欠失が5家系、挿入が2家系、スプライス部位の変異が2例であった。欧米の報告と異なり、nonsense変異はみられなかった。また、散発性の血管芽腫および腎癌の組織においても、同様の解析を行った結果、VHL腫瘍抑制遺伝子の変異と3p25-26領域を中心にヘテロ接合性の消失を約70%に認め、この遺伝子がこの2つの腫瘍の原因遺伝子と考えられた。さらに、この遺伝子の発現をin-situ hybridization法にておこなったところ、腎および小脳、脳幹部に発現を認めた。

研究成果

• [文献書誌] Hiroshi Kanno et al.: "Somatic mutations of the von Hipped-Lindaw tumor suppresson gene in sporadic central nervous system hemengioblastomas" Cancer Research. 54. 4845-4847 (1994)
• [文献書誌] Taro Shuin: "Frequent somatic mutation and loss of heterozygosity of the von Hippul-Lindau tumor suppresson gene in primary human renal cell cawnomas" Cancer Research. 54. 2852-2854 (1994)
• [文献書誌] Clinical Research Group for VHL in Japan (Kanno H,Shuin T,Yao T, at el): "Germline mutations in the von Hippel-Lindan disease(VHL)gene in Japanese VHL" Human Molecular Genetics. 4. 2233-2237 (1995)