| 研究概要 |
ヒト前立腺のNOS活性の測定
^3H-Arginineが一酸化窒素合成酵素(Nitric Oxide Synthase : NOS)の作用で^3H-Citrullinに変換されることを利用して,ヒト前立腺腺腫のNOS活性を前立腺肥大症標本(PH)と正常標本(NPH)とで測定し,両群での差異について検討した.NOSを抽出する段階で,標本をホモジナイズし遠心分離で得られた上清と沈渣の両者について活性を測定した.またNOS活性へのCalmodulinの影響を調べることでNOSのisoformについても検討し,次の結果を得た.
1.ヒト前立腺には,soluble NOS(Calmodulin依存性)とendothelial NOS(Calmodulin非依存性)とが存在する.
2.前立腺肥大症群の腺腫では,soluble NOSには変化は見られなかったが,endothelial NOSが有意に低下している.
これらのことから,前立腺肥大症の腺腫ではendothelial NOSが有意に低下し,前立腺肥大症の病態にNOが関与していることが推測された.
ヒト前立腺のNOSのWestern Blotによる検出
NOSのアミノさん酸配列に基づいてペプチドを合成し,それを用いてウサギを免疫して抗体を得た.しかしどの抗体も特異性が無く,Western Blotによるヒト前立腺のNOSの検出は成功しなかった.異なるアミノ酸配列の何種類かのペプチドで免疫を試みたがいずれも特異的な抗体を得ることができなかった.
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